三疣梭子蟹Pt-ddit4l基因的克隆及表达分析
2021-04-01阎德平吕建建题兴斌
阎德平 吕建建, 陆 璇 张 文 题兴斌 宋 柳 刘 萍,
(1.中国水产科学研究院黄海水产研究所, 农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室, 青岛 266071;2.青岛海洋科学与技术国家实验室, 海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室, 青岛 266071)
三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)是一种重要的海洋经济动物, 因其肉味鲜美, 蛋白含量高, 已成为我国沿海地区的主要养殖蟹类, 在黄渤海及东海区域养殖尤为广泛[1,2]。随着养殖规模的不断扩大, 病害爆发愈加频繁, 给梭子蟹养殖业造成了巨大的经济损失。而副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是造成三疣梭子蟹批量死亡的主要致病菌之一[3]。本实验在前期开展的弧菌胁迫全基因组重测序中成功检测并鉴定到一个跟副溶血弧菌性状相关的SNP标记(P=0.013, 数据未发表), 并成功定位于ditt4l(DNA damage inducible transcript 4 like)基因上, 推测该基因可能是一个具有副溶血弧菌抗性的基因。
DDIT4L又被称为REDD2/RTP801L, 该基因具有参与DNA损伤修复和介导细胞凋亡的功能, 是DDIT家族中重要的一员[4,5]。该基因首先发现于人的白血病细胞系中, 在相关处理下, 可以使细胞行使吞噬功能, 随后形成参与免疫反应的巨噬细胞[6]。ddit4l基因在哺乳动物的C端相当保守, 含有一个RTP_901C蛋白结构域。此外ddit4l基因还具有调节胚胎发育、参与无氧代谢及介导细胞凋亡的功能[7—9]。但目前尚未有该基因在甲壳动物免疫防御方面的报道。
为了探究三疣梭子蟹Pt-ddit4l基因的结构特征和功能, 克隆了三疣梭子蟹Pt-ddit4l的cDNA全长,并对不同发育阶段、组织分布、弧菌感染和RNA干扰下的表达情况进行了深入的研究, 为丰富DDIT基因家族的功能提供了参考, 也为进一步研究三疣梭子蟹在弧菌感染下的免疫防御机制提供理论依据。……
