黄创新 胡鹏

随着我国医疗技术的技术,对常见肿瘤疾病的尽早发现及治疗取得一定成绩,其中乳腺癌作为女性群体最为常见的恶性肿瘤疾病,需有效治疗,评估预后［1］。根据临床研究可知,HER-2 基因扩增、蛋白过表达乳腺癌患者预后差,HER-2 和表皮生长因子的基因产物有广泛的同源性,是表皮生长因子受体家族中表达广泛的受体,可促进肿瘤新生血管生成,促进肿瘤细胞存活,增加肿瘤细胞的侵袭力,可作为预测乳腺癌预后的可靠依据［2］。为此,本次研究对乳腺癌患者行HER-2基因检测的意义进行了探讨,报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2018 年1 月～2019 年12 月本单位38 例手术切除乳腺癌石蜡标本,检测HER-2 基因状态,所有患者均经手术病理确诊为原发性乳腺癌［3］。患者年龄33～75 岁,平均年龄(51.02±3.26)岁,临床分期：Ⅰ期7 例,Ⅱ期21 例,Ⅲ期10 例。

1.2 方法

1.2.1 IHC 法 蜡块连续切片,厚度3 μm,置入60℃烤箱脱蜡,确保本中均有肿瘤组织。65℃烤片2～4 h,浸泡于二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ脱蜡各20 min,100%酒精20 min,95%酒精20 min,85%酒精20 min,水冲,切片置入0.3%过氧化氢-甲醇溶液中,室温下孵育10 min,水冲,磷酸缓冲液(PBS)洗,置入抗原修复液内微波修复10 min,PBS 液洗,滴50 μl 山羊血清,室温下孵育10 min,加一抗,37℃下孵育60 min,PBS 液洗,加物素化二抗工作液,37℃下孵育30 min,PBS 液洗,DAB 显色3～10 min,水洗、苏木素淡染,蓝化,脱水,透明,中性树胶封片。

1.2.2 FISH 法 蜡块切片,取多块3 μm 切片放置在玻片上,置于65℃下过夜烘烤,浸于二甲苯中室温脱蜡2 次,各10 min,浸入100%乙醇5 min,100%乙醇2 min,85%乙醇2 min,70%乙醇2 min,浸入去离子水中3 min,50℃下30%(W/V)酸性亚硫酸钠处理切片20～30 min,2X SSC 溶液中漂洗2 次,0.1 MHCI 浸泡5～10 min。2X SSC 溶液中漂洗2 次,乙醇脱水,丙酮固定,加热玻片至56℃。……