薛建鹏，刘少锋，汪瑾，杜南星，宋如铮，李瑜玲，张清昕，徐寒梅

（中国药科大学 江苏省合成多肽药物发现与评价工程研究中心，江苏 南京210009）

基质金属蛋白酶（matrix metalloproteases，MMPs）是一类依赖于锌离子和钙离子的内源性蛋白水解酶，可由成纤维细胞、中性粒细胞、巨噬细胞及肿瘤细胞合成和分泌。MMPs可分为胶原酶、明胶酶、间质溶素类、膜型基质金属蛋白酶（membrane-type matrix metalloproteinase，MTMMPs）、基质溶解酶和其他MMPs，主要参与组织重构和细胞外基质（extracellular matrix，ECM）降解等重要生理过程[1]。细胞外基质分布在细胞表面或细胞之间，由基底膜（basement membrane，BM）和细胞间基质组成，具有阻止肿瘤细胞转移的作用。因此，细胞外基质的降解是肿瘤浸润和转移的早期步骤。

MMP-2和MMP-9是最重要的MMPs，在胰腺癌[2-3]、乳腺癌[4-5]、膀胱癌[6-8]、宫颈癌[9-10]等多种肿瘤中都有异常表达，在肿瘤生理和病理进程中起着关键性的作用。肿瘤微环境中的MMP-2和MMP-9高度特异性表达，可以降解肿瘤细胞表面的主要结构成分，使肿瘤细胞从缺失的BM向周围组织浸润，促进肿瘤细胞侵袭和转移[11]（见图1）。因此，通过构建检测MMP-2/9活性的探针并利用MMP-2/9的底物特异性进行成像，可以实现对肿瘤恶性程度及转移风险的预估，从而进行及时治疗。因此，本文针对检测MMP-2/9的响应型多肽探针构建的机制及相关应用进行了综述。

图1 MMP-2/9所介导的肿瘤转移Figure 1 MMP-2/9-mediated tumor metastasis

1 常用基质金属蛋白酶的检测方法

目前，在对MMPs进行定性分析时，最常用的检测方法是明胶酶谱法（zymography）。明胶酶谱法利用非还原十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶 电 泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）和反向凝胶染色来检测MMPs的活性，但该方法存在如MMPs的变性和复性步骤耗时长、孵育液含剧毒药物等缺陷。……