杨志刚，汤德元，张 森，韩超逸，晏仁潭

(贵州大学动物科学学院，贵州贵阳 550025)

猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)是导致哺乳仔猪和断奶仔猪腹泻的主要原因之一。英国于1974年首次报道了该病，随后在北美洲、南美洲、非洲和澳大利亚都有报道该病。我国于1981年首次分离到该病毒，目前PoRV在东北、华北、华南、西北等地都有报道[1-3]。该病毒通过粪-口途径传播，感染肠道肠上皮细胞，临床症状为腹泻、呕吐、厌食、脱水。猪轮状病毒是呼肠孤病毒科、轮状病毒属成员，是一种双链RNA病毒，基因组包含11段双链RNA，编码6个结构病毒蛋白(VP1-VP4、VP6和VP7)和5个非结构蛋白(NSP1-NSP5/6)。轮状病毒基于其VP6蛋白抗原性不同分为10个基因群(A-J)，其中RVA、RVB和RVC与仔猪腹泻有关，几十年前就发现猪的RVE，但不常见，近年来在日本、巴西和美国发现了猪的RVH[4]。尚无针对该病毒的有效治疗药物，虽然开发出了相应的疫苗，但由于PoRV区域流行不同和遗传多样性，导致该病毒不能完全被控制。轮状病毒基因群、基因型多样及该病毒与猪其他引起肠道症状病毒发病症状相似，在临床上难以辨别，故对本病即时准确诊断方法的建立就显得尤为重要。本文总结了PoRV的检测技术，旨在为PoRV的现场诊断和预防该病提供技术支持。

1 传统方法

1.1 病毒的分离培养

PoRV的分离培养可以采用MA104细胞系、Marc-145细胞系和Vero细胞系等。时洪艳等[5]从内蒙古某猪场患病猪腹泻粪便中分离1株病毒，将该分离株在MA104细胞上进行盲传，连续传至25代，并进行3次蚀斑纯化，通过电镜观察、PCR鉴定和序列测定进行分析，分离出1株PoRV。……