张明焕 毛文 刘雷 祁福 李北 郑一舟

(武汉市第三医院骨科，湖北 武汉 430000)

骨关节炎(OA)是一种常见的关节退行性疾病，其主要病理特征为关节软骨细胞凋亡和细胞外基质的进行性降解〔1〕。近年来研究发现，中药在OA的临床治疗中治疗效果更佳，中药复方剂对阻断或延缓软骨细胞凋亡有一定作用〔2,3〕。熟地黄多糖(RGP)是中药熟地黄的主要成分，具有增强免疫、抗氧化、抗突变等作用〔4〕。此外，熟地黄在治疗类风湿关节炎的方剂中发挥辅助作用，且含熟地黄的中药配方对膝骨关节炎有良好的疗效〔5,6〕。熟地黄多糖还能有效诱导H22荷瘤小鼠肿瘤细胞发生凋亡〔7〕。微小RNA(miRNA)是一类单链非编码的小分子RNA，与OA软骨基质降解过程中的炎性介质及各种细胞因子密切相关〔8〕。研究发现miR-140在OA组织中表达显著减少，且参与软骨细胞的重塑修复过程，与OA的发生发展密切相关〔9〕。但熟地黄多糖对OA软骨细胞增殖、凋亡及炎性因子的影响及熟地黄多糖影响OA的机制是否与miR-140相关还尚未清楚，本实验旨在研究熟地黄多糖对OA软骨细胞增殖、凋亡及炎性因子的影响及其作用机制，为OA临床诊断和治疗提供新的方向。

1 材料与方法

1.1材料与试剂 胎牛血清、DEME培养基均购自美国Gibco公司；RNA提取试剂盒、反转录试剂盒和qRT-PCR试剂盒购自日本Takara公司；LipofectamineTM 2000转染试剂盒购自美国Invitrogen公司；酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒、CCK-8试剂盒、蛋白提取试剂盒、BCA试剂盒、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)和碘化丙锭(PI)试剂盒购自碧云天生物技术研究所；抗体购自上海煊翎生物科技有限公司。……