吴海涛 陈小忠 赵洪新 申昊 杨朝志 岳翔 张平 王培

(遵义医科大学附属医院神经外科，贵州 遵义 563000)

脑胶质瘤是中枢神经系统发病率最高的恶性肿瘤，具有高增殖性、侵袭性及易复发的特点〔1〕。目前临床治疗以手术联合放化疗为主，但预后较差，患者5年生存率很低〔2〕。虽然脑胶质瘤的发病机制尚未完全明确，但研究者已发现脑胶质瘤属于多基因异常性疾病〔3〕，原癌基因的高表达和抑癌基因缺失共同导致了肿瘤细胞的异常调控机制〔4〕。软骨素聚合因子(ChPF)是一种由多种氨基酸构成的跨膜蛋白，在结肠癌、头部鳞状细胞癌中存在高表达，且可能介导肿瘤的发生、发展〔5〕。ChPF蛋白在脑胶质瘤组织中表达水平明显高于正常脑组织〔6〕；本实验以此为基础，并结合相关文献〔7～9〕，推测ChPF高表达可能提升脑胶质瘤细胞活性，其作用机制可能与调控单核细胞趋化蛋白(CCL2)有关。本研究通过重组慢病毒质粒转染技术下调人脑胶质瘤A172细胞中ChPF表达，观察对细胞增殖、侵袭的影响，并进一步下调细胞中CCL2表达，探讨ChPF对CCL2表达的单向调控机制。

1 对象与方法

1.1主要材料与试剂 人脑胶质瘤细胞系A172购于上海慧颖生物科技有限公司。携带绿色荧光蛋白的载体构建ChPF-shRNA及其阴性对照Nc-shRNA重组慢病毒质粒购于博格隆(上海)生物技术有限公司；CCL2-shRNA及其阴性对照Nc-shRNA重组慢病毒质粒购于上海英骏生物技术有限公司；胎牛血清、DMEM培养基购于沃卡威(北京)生物技术有限公司；Lipofectamine 3000购于上海索宝生物科技有限公司；……