谷红 裴云逸

玉溪农业职业技术学院 云南玉溪 653100

黄酮类化合物是中药材中最常见活性物质。研究证明：黄酮类化合物具有抗氧化、抗菌等多种生理活性及药理作用，对人类肿瘤，心血管等疾病的治疗和预防有重要意义[1]。

本文选用芦丁为标准对照品，用紫外-可见分光光度法对甘草、葛根、黄芩、金银花四种中药材中总黄酮含量进行测定。

1 仪器与材料

（1）仪器岛津紫外可见分光光度计、电子天平、超声波清洗器、粉碎机、60目筛子。

（2）材料中药材甘草、葛根、黄芩、金银花购自云南玉溪红塔区，芦丁标准品（中检所）、亚硝酸钠（AR）、硝酸铝（AR）、氢氧化钠（AR）、无水乙醇（AR）、水为纯净水。

2 实验部分

2.1 试剂

芦丁标准溶液：精密称定芦丁标准品10mg，置50ml容量瓶中，用体积分数65%的乙醇稀释至刻度，即得浓度为0.2mg/ml的芦丁标准溶液[2]。

5%亚硝酸钠溶液：称取亚硝酸钠2.5g，置50ml容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀，即得。

4%氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠4g，置100ml容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀，即得[3]。

10%硝酸铝溶液：称取硝酸铝5g，置50ml容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀，即得。

2.2 样品处理

甘草、葛根、黄芩、金银花中药材粉碎，过60目筛干燥备用。各称取1g，置50ml容量瓶，加入65%乙醇适量溶解，40℃超声波提取45min，用65%乙醇定容至刻度，摇匀，过滤，备用。

2.3 试验方法

准确移取上述芦丁标准溶液0，0.50，1.00，1.50，2.00，2.50ml，分别置10ml具塞刻度试管中，加入5%亚硝酸钠溶液0.30ml，放置6min，加入10%硝酸铝溶液0.30ml，放置6min，再加入4%氢氧化钠溶液4.00ml，用65%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15min，以空白溶液为参比，在508nm处测定吸光度，以测出的吸光度绘制标准曲线，并根据标准曲线计算四种中药材中总黄酮的含量[4]。……