柴桂口服液对LPS诱导的小鼠炎症的抑制作用
2021-03-29贾妮娜谢小东陈晓霞于美玲韦英益胡庭俊
肖 琦,贾妮娜,谢小东,施 君,陈晓霞,于美玲,韦英益,胡庭俊
(广西大学动物科学技术学院,广西南宁 530005)
柴胡和桂枝相关方剂具有抗炎、抗氧化、增强免疫力和改善代谢等作用[1],以柴胡桂枝干姜汤为母本延伸出的药剂在临床中可用于治疗胃肠型感冒、溃疡性结肠炎、慢性胆囊炎和病毒性肝炎等疾病[2],具有很好的抗炎效果。
本试验采用的柴桂口服液经由《伤寒论》中柴胡桂枝干姜汤设计而来,通过小柴胡汤和桂枝汤加减而成[3]。本试验参照文献[4-5]小鼠体内炎症模型构建方法,以脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)为致炎剂,建立小鼠体内炎症模型,研究柴桂口服液对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-8(interleukin-8,IL-8)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和一氧化氮(nitric oxide,NO)表达和分泌水平的调节作用,以期在临床用药时为该方剂的使用提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药品与试剂 柴桂口服液(批号:20190901),河南牧翔动物药业有限公司中试生产,规格:1.44 g/mL ;地塞米松注射液(批号:180602),上海同仁药业股份有限公司上海兽药厂产品,规格5 mg/5 mL;脂多糖(批号:320v0320),北京索莱宝科技有限公司产品;小鼠TNF-α、IL-6、IL-8和IL-1β试剂盒(批号分别为M191008-102a、M190919-004a、M191008-104a、M91008-001a),欣博盛生物有限公司产品;一氧化氮(NO)、总蛋白(Total protein,TP)试剂盒(批号分别为20191007、20190930),南京建成生物试剂有限公司产品;Cham QTM Universal SYBR Qpcr master Mix(批号20210124)、StarScript Ⅱ First strand cDNA synthesis Mix(批号9AHO1);RNA isolater R401-01(批号2021.05.17),南京诺唯赞生物科技有限公司产品;氯仿、无水乙醇等为分析纯。
1.1.2 实验动物 4周龄昆明种小鼠70只,SPF级,临床健康,体重18 g~22 g,雌雄各半,购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司,动物合格证号SCXK(湘)2016-0002。动物购买后适应性饲养5 d。饲养环境:室温25℃±2℃,相对湿度40%~75%,室内无对流风。……
