过表达冷诱导RNA结合蛋白对BHK-21细胞增殖的影响
2021-03-29冉丹丹
朱 鑫,冉丹丹*,汤 承,岳 华
(西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都 610041)
冷诱导RNA结合蛋白(cold-inducible RNA binding protein,CIRP)又称为A18 hnRNP,属于RNA结合蛋白中的核内异质核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein,hnRNP)家族,是一种在脊柱动物的组织器官内广泛存在且表达高度保守的蛋白。近年来,CIRP作为研究重点,其许多功能被相继证实,如人们发现CIRP除了在低温(29℃)刺激下表达明显增高外,还能被其他应激条件如缺氧、紫外线等诱导而过量表达,并对细胞在上述应激条件下起到保护作用[1-3]。在丝裂原活化蛋白激酶信号通路 (MAPK/ERK)和核因子κB信号通路(NF-κB)的调控中均有CIRP的参与,其中MAPK信号通路中的ERK1/2途径在调节细胞增殖过程当中起关键性作用[4-5],CIRP还能参与调节细胞的基本功能,包含细胞增殖和凋亡、细胞周期以及细胞骨架等过程[6-8]。
CIRP作为一个多功能蛋白,对作为生命最基本单位的细胞发育过程有重要的作用。在试验细胞进行H2O2处理过程中,CIRP表达下调加重细胞凋亡,CIRP对心脏氧化应激诱导的细胞凋亡具有保护作用[9],CIRP可能参与SISAP引起的早期肝损伤的病理进程[10]。在雄性小鼠未成熟的精细胞中,CIRP通过与双重特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1B(Dyrk1b)相互作用来调节一些蛋白的磷酸化水平,从而促进未分化精原细胞的增殖。本试验通过对CIRP过表达的乳仓鼠肾细胞(BHK-21)进行研究,探索CIRP对BHK-21细胞增殖情况的影响,为研究CIRP的功能提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞株 CIRP稳定过表达及敲低CIRP的BHK-21细胞系由西南民族大学动物医学四川省重点实验室构建[11]及保存;CIRP过表达的BHK-21标记为BHK-21-Cirp,CIRP敲低的标记为BHK-21-ShCirp,只含有绿荧光报告载体的标记为BHK-21-GFP。……
