双峰母驼肌肉中TPM2与TPM3表达模式及对肌纤维细胞凋亡的影响
2021-03-29李海江李宗帅董伟韬赵兴绪
李海江,王 琪,李宗帅,董伟韬,张 勇,赵兴绪
(甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070)
双峰驼(Bactrian camel)属于骆驼科骆驼属,既是季节性发情又是诱导排卵型动物,本研究用蛋白组学技术对繁殖季节和非繁殖季节双峰驼血清进行分析,发现TPM2和TPM3与双峰驼肌肉生长发育有关。原肌球蛋白家族共有4个基因,分别为TPM1(α基因)、TPM2(β基因)、TPM3(γ基因)和TPM4(δ基因)[5]。在肌肉细胞中,TPM主要参与调节肌肉收缩过程,通过调节ATP酶活性,达到稳定肌细胞骨架结构作用。TPM2和TPM3与体内许多生命活动直接相关,如胞质分裂、胞膜物质转运、细胞运动、诱导细胞凋亡及信号转导等[1]。TPM2与TPM3在动物繁殖育种方面,近年来分别用表达芯片技术、抑制消减杂交技术、ITRAQ、RT-qPCR,TPM2是并行存在细肌丝与肌动蛋白之中,TPM3是介导肌球蛋白-肌动蛋白对Ca2+离子的反应蛋白,二者共同稳定肌细胞骨架微丝,参与骨骼肌、平滑肌、心肌收缩系统的组成[2]。细胞凋亡是哺乳动物细胞生命活动中的关键事件,在机体细胞中,Bax和Bcl-2因子参与细胞的正向和负向调控,且在凋亡信号转导途径中发挥着关键的作用,共同参与细胞凋亡的调控,故而它们用作检测细胞凋亡的主要指标[3]。
近年TPM2和TPM3的研究仅在人类疾病及其他物种的研究,在双峰驼方面的研究甚少。基于GenBank中收录的双峰驼TPM2和TPM3基因全序列,本研究用RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学技术检测TPM2和TPM3在不同肌肉组织中的表达谱,用免疫荧光和siRNA技术分别检测TPM2在细胞中的定位以及对双峰驼肌肉肌纤维细胞凋亡的影响,为进一步揭示其功能提供理论依据。……
