抗传染性支气管炎病毒S1蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
2021-03-29李佳楠周景明祁艳华张改平王爱萍
李佳楠,杜 林,周景明,祁艳华,马 强,张改平,王爱萍*
(1.郑州大学生命科学学院,河南郑州 450001;2. 东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨 150040)
传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)是严重危害家禽业的一种高度传染性病原体,易感染呼吸道,也可引起禽类肾脏和生殖道疾病[1]。IBV是一种单股正链RNA病毒,基因组全长约27 kb,主要编码参与病毒复制的非结构蛋白、3种主要的结构蛋白(S糖蛋白,E蛋白,M蛋白)和参与基因组包装的N蛋白[2]。S糖蛋白由S1和S2亚基组成,S1亚基含有受体结合域,负责病毒附着宿主细胞并能刺激宿主产生中和抗体,因此S1蛋白被认为是最为重要的结构蛋白[3]。由于病毒重组和宿主选择压力使S1蛋白突变较高率[4],导致IBV不断产生变异从而出现新的血清型和基因型[5-6],给鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)的诊断和预防带来困难。
S1蛋白结构功能复杂,为研究S1蛋白带来一定阻碍,利用基因工程技术获得S1蛋白相对容易。目前,国内外许多学者以杆状病毒、腺病毒和哺乳动物细胞系等真核表达系统成功表达获得了S1蛋白[7-8],但由于表达量低和糖基化不完全等原因不利于S1蛋白的大量获得。邹年莉等[9]截取S1蛋白一段抗原区(81-422aa)进行原核表达,并制备了抗IBV S1蛋白的单克隆抗体。本研究通过分析S1蛋白的结构,选择抗原性高、亲水性好且包含潜在受体结合位点的一段抗原区(241-414aa)进行表达,获得重组S1蛋白并制备针对IBV S1蛋白的单克隆抗体,以期为IB的诊断、IBV快速检测方法的建立和S1蛋白结构功能的研究提供材料。……
