王长江，曲光刚,*，武曰星，郭广君，韩 强，赵中伟，沈志强,*

(1.山东省滨州畜牧兽医研究院，山东滨州 256600；2.山东绿都生物科技有限公司，山东滨州 256600)

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2，PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原[1]，还可引起感染猪的免疫抑制和猪皮炎与肾病综合征(PNDS)、母猪繁殖障碍、仔猪先天性震颤等疾病[2]。现阶段猪群感染PCV2后尚无特效治疗性药物，对PCV2相关疾病的防控主要集中在防止继发感染、提高机体抵抗力等方面。纳米抗体(nanobody，Nb)[3]具有稳定的分子结构以及良好的热稳定性，可溶性极高，不易聚集，能耐强酸、强碱等致变性条件，适于原核表达和各种真核表达系统[4]，并且已被证明具有高效的抗原结合活性。Nb许多方面均优于传统抗体，在治疗性抗体药物研发[5]、临床体外诊断[6]、肿瘤研究和免疫学研究等领域[7]均获得广泛应用。但其在临床应用过程中也存在半衰期短、有效性相对较低等不足。多价抗体是识别同种或不同表位的单价抗体的聚合物，比单价抗体具有更高的抗原亲和活力，并且能够显著延长在体内的半衰期[8]。自双特异性抗体药物Blinatumomab进入市场以来，人们对双价和双特异性抗体的研究兴趣日益增加[9]。双价双特异性抗体能够识别相同抗原或不同抗原上的多种抗原表位[10]，因此具有更广泛的功能和用途。Nb因其结构简单、易于进行基因操作和可用原核或真核细胞进行表达的优势使其容易被开发成双价或双特异性纳米抗体。研究表明，双价纳米抗体对流感病毒的抑制作用至少是相应单价纳米抗体的60倍[11]。……