猪瘟病毒和猪圆环病毒2型二重荧光LAMP检测方法的建立

2021-03-29谢志勤张民秀谢芝勋罗思思谢丽基黄娇玲曾婷婷张艳芳邓显文刘加波

动物医学进展 2021年3期

关键词：方法

谢志勤，张民秀，谢芝勋，范晴，罗思思，谢丽基，黄娇玲，王盛，曾婷婷，张艳芳，李孟，李丹，邓显文，刘加波

(广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室，广西南宁 530001)

猪瘟(Classical swine fever，CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)引起猪的一种急性和高度接触传染性疾病，以稽留高热、皮下出血、脾梗死等为特征，病死率高。我国对CSF采取了很多严格的防疫措施,有效地控制了猪瘟的广泛流行,但是该病在我国以及世界许多养猪国家依然存在[1]。猪圆环病毒病(Porcine circovirus disease,PCVD)是由猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)引起的猪一种传染病，以早期淋巴结肿大，食欲不振，呼吸困难，腹泻，早产及死胎等为特征，发病率和病死率较高[2-4]。

近年由CSFV和PCV2共同感染引发猪病的报道较多[5-7]。原因是PCV2感染率高，导致一些猪场出现CSF免疫失败，从而引发PCV2感染的同时感染CSFV，临床表现为体温升高、急性死亡、怀孕母猪流产或死胎等，根据临床症状很难做出判断，需要借助实验室手段进行确诊。常用的实验室方法很多[8-14]。本研究分别在CSFV和PCV2特异性引物上标记不同的荧光基团和淬灭基团，经LAMP反应后，标识在CSFV和PCV2序列上的不同荧光基团断裂而游离，在特定的荧光通道下，游离的不同荧光基团发出不同的颜色，根据不同颜色一次反应能同时鉴别CSFV和PCV2。