杨 丽

（辽宁省凌海市农业农村发展中心-动物疫病预防控制中心，辽宁 凌海 121200）

血凝和血凝抑制试验是目前县级疫控中心兽医实验室进行禽流感、新城疫动物疫病监测最常用的试验方法之一。但血凝和血凝抑制试验在实际操作中经常受到多种因素的影响，增加了试验误差，甚至改变了试验结果，本文结合实际工作，将影响试验结果的因素进行总结分析。

1 被检样品对试验结果的影响因素

1.1 样品处理 采样后将样品倾斜放置2～4h（防止暴晒），让其自然析出血清(夏天放在室内,冬天可以放置在37℃温箱内析出)。避免摇晃，防止溶血。采血后尽量避免马上离心，防止分离后的血清形成胶冻状或不完全胶冻样。特殊情况需要分离血清时，需1500～2000转/min，离心5min。

1.2 样品保存 采样后要及时送检，不能在24h内送到的，全血要分离出血清，将血清冷冻后送检。分离的血清在冷藏温度下（4℃）存放不能超过5d，冷冻温度下（-20℃）不能存放时间过久（6个月为宜），冷冻后的血清不能反复冻融（不宜超过3次），会直接导致抗体效价降低。血清样品保存不当，无论是运送中还是检验中，腐败变质会严重影响试验结果。

2 鸡红细胞的制备对试验结果的影响因素

2.1 鸡红细胞的采集 实验室应准备3只SPF公鸡，条件不足的也可选免疫过禽流感和新城疫疫苗的的健康公鸡，但应比正常洗涤血球次数增加3～5次，洗去红细胞表面的抗体，以减小结果误差。

给大公鸡采血时要做到无菌操作，用一次性注射器(10mL、9号针头)可在一个大容器内先加入抗凝剂，采血后拔下针头将容器倾斜，沿着容器壁将血缓缓打入，注意速度不要太快，以免挤破红细胞。……