叶裕香

（宁德市动物疫病预防控制中心，福建 宁德 352100）

血凝和血凝抑制试验是进行动物疫病诊断和免疫抗体水平监测最常用的方法之一，常用于禽流感、鸡新城疫等动物疫病的血清学监测，在实际操作过程中，常因实验人员的操作水平，实验环境因素，血清采集质量等环节的影响，导致试验结果偏差。现将主要影响因素归纳如下，供参考。

1 试验前准备的影响

1.1 试剂的配制准备 稀释液最好是用0.01mol/LpH7.2的等渗磷酸盐缓冲液（PBS)，宜现配现用，如果用生理盐水代替PBS液，要使用新开瓶的灭菌生理盐水；阿氏液应经高压灭菌4℃保存备用。

1.2 试验用1%鸡红细胞悬液的配制 试验前应准备好3只以上的无特定免疫公鸡（SPF健康公鸡）或无禽流感、无新城疫抗体的健康公鸡，如果直接使用体内存在上述抗体的公鸡将会对试验结果产生影响。采血时，应无菌操作，按采血量的一定比例先抽取配好的阿氏液，然后采血，采血量与阿氏液等体积混合，反复颠倒几次，充分混均，防止血液凝固。采血后，将采出的3～4只公鸡血混合后再离心，这样配出的红细胞均匀一致。洗涤红细胞时切记吸放红细胞及注入PBS液时应尽量轻柔，切忌用力，否则红细胞会破裂造成溶血，影响试验结果。在洗涤红细胞过程中，每次离心后均应将白细胞层等吸除干净。如果所配制的红细胞浓度偏高，则血凝价可能偏低，血凝抑制价可能偏高；如果红细胞浓度偏低，则血凝价可能偏高，血凝抑制价可能偏低。……