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鸡胚原代肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离培养与鉴定

2021-03-29郗蒙雪戴鹏远沈丹李春梅

南京农业大学学报 2021年2期

郗蒙雪,戴鹏远,沈丹,李春梅

(南京农业大学动物科技学院/南京农业大学家畜环境控制与智慧生产研究中心,江苏 南京 210095)

集约化畜禽养殖生产过程中可产生大量的颗粒物(particulate matter,PM)、氨气(NH3)、硫化氢(H2S)等空气污染物,它们能够通过呼吸进入肺泡,增加患呼吸系统疾病风险,危害畜禽健康[1]。柏仕均等[2]研究报道,鸡舍空气粉尘污染致鸡出现呼吸道黏膜干燥、萎缩等症状。申慧敏等[3]发现,鸡舍中NH3、H2S等有害气体容易通过鼻腔进入呼吸道,造成呼吸困难、气管炎和支气管炎、肺水肿、呼吸机能紊乱等现象,严重危害鸡的机体健康和生产性能。肺泡Ⅱ型上皮细胞(type Ⅱ alveolar epithelial cells,AECⅡ)是肺泡内重要的功能和结构细胞[4]。AECⅡ细胞能够分化为肺泡Ⅰ型上皮细胞,具有无限增殖能力,促进肺泡上皮细胞再生与修复,维持上皮细胞的完整性[5]。AECⅡ细胞还具有肺水转运功能,可消除肺水肿[6]。AECⅡ细胞还可以分泌表面活性物质,抵御病原体的入侵[7]。除此之外,它还能够分泌一些抗炎、抗菌物质,提高免疫功能[8-9]。因此,AECⅡ细胞是多种肺部疾病发病的攻击靶点[10-11],已有大量研究表明,许多肺部疾病的发生与发展伴有AECⅡ细胞的损伤,甚至是死亡[12-13]。因此,在有关鸡舍空气污染物对鸡肺泡功能及肺部炎症损伤的研究中,鸡的AECⅡ细胞是非常重要的体外细胞模型。尽管目前国内外已有大量对大鼠、小鼠、牛等[14]的AECⅡ细胞分离培养方法的相关报道,但是在禽类的研究较少。有试验表明,AECⅡ细胞在培养过程中贴壁速度慢,不易增殖分裂,不易传代[15],而且随着培养时间的延长,细胞形态和功能逐步丧失[16],因此目前尚未有鸡AECⅡ细胞株,这也限制了开展有关鸡AECⅡ细胞的相关研究[17]。……

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