赵国有 林滢 于维森

(青岛市疾病预防控制中心 山东青岛266033)

1 前言

酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assays，ELISA)具有敏感度高、特异性强、自动化程度高、适合大批量标本检测等诸多优点，目前在很多领域都得到广泛应用。但该方法操作步骤较多，对试验结果的影响因素较多，对实验人员、仪器设备、试剂等有较高要求，操作步骤若不规范会对试验结果产生极大影响[1]。本文利用不确定度来源分析的理念[2-3]，对ELISA测定中的不确定度来源进行归纳与分析，确定影响ELISA试验结果的主要因素，并采取合适的措施和规范的操作，将其对结果的影响控制在可接受的水平。

2 确定ELISA试验检测结果不确定度来源

ELISA检测过程中，主要的环节包括样品制备、试剂的选择、加样、温育、计时、洗板、酶标仪测量、结果计算等。

按照测量不确定度来源分析的理念，针对ELISA检测的操作环节，对ELISA测定中不确定度的来源进行分析。

2.1 A类不确定度因素

A类不确定度影响因素包括(但可能不限于)对被稀释后的被检血清或抗原的每个浓度进行的多个平行进检测引起的不确定度、不同人员之间不同检测同一样品引起的测量不确定度、标准样品引起的不确定度、不同品牌试剂用于同一血清进行引起的不确定度、被检样品/试剂盒存放条件引起的不确定度、采样是否正确及样品是否被污染引起的不确定度、样品运输和储存条件引起的不确定度、处理样品引起的不确定度、环境条件引起的不确定度、设备因素引起的不确定度、未知的随机因素引起的不确定度。……