于新友，毕宁宁，李天芝，李书光，肖跃强，刘吉山*

(1.山东绿都生物科技有限公司，山东 滨州 256600；2.山东省滨州市滨城区行政审批服务局，山东 滨州 256600；3.山东省滨州畜牧兽医研究院，山东 滨州 256600)

牛结节性皮肤病(Lumpy skin disease，LSD)又称牛结节疹或牛疙瘩皮肤病，是由牛结节性皮肤病病毒(LSDV)引起的一种牛急性、亚急性病毒性传染病。临床表现主要为发热，皮肤出现结节，母牛流产、产奶量下降，公牛不育[1]。此外，还可致牛和其产品出口受阻及高额的疾病防控成本，给养牛业造成严重的经济损失。牛是LSDV的天然宿主，各年龄和品种牛均易感，无特异性治疗方法。不是人兽共患病[2]。该病有明显的季节性特征，常见于吸血节肢动物繁殖旺盛的夏、秋季节。世界动物卫生组织将其列为必须报告的动物传染病，我国将其列为二类动物疫病[3]。1929年，赞比亚首次报道该病[4]，后传入中东、东欧、中亚等世界其它地区。2019年8月12日，我国新疆哈萨克自治州首次确诊该病存在[5]，随后福建、安徽、浙江等均有相关报道。LSDV只有一个血清型，不同毒株的毒力不同。本文对牛结节性皮肤病的病原学、流行病学、临床症状及病理变化、诊断、防控措施等方面进行了较全而的阐述，以期为该病的诊断和防控工作提供参考。

1 病原学

LSDV属于痘病毒科羊痘病毒属[6]。病毒粒子有无囊膜，呈砖块状或椭圆形，直径约为260～320 nm。病毒基因组为双链DNA，与绵羊痘病毒基因组的同源性高达96%，大小约151 kb，由156个假定基因组成[7]。病毒只有一种血清型[8]，同绵羊痘病毒和山羊痘病毒间存在一定交叉免疫保护性。

病毒对外界环境抵抗力强，尤其在寒冷干燥冬季，可存活较长时间。痂皮中及坏死皮肤结节中病毒可存活1个月左右，37 ℃条件下5 d内病毒滴度几乎不变，55 ℃ 2 h或65 ℃ 30 min病毒可被杀活，阳光直射下病毒很快被紫外线杀灭。4℃下组织中病毒可存活6个月，病毒最适存活pH范围为6.6～8.6[9]，对强酸和强碱耐受性低，对含脂溶剂和去污剂敏感，乙醚、氯仿、十二烷基硫酸钠均能有效灭活病毒，常规消毒剂1%甲醛、2%氢氧化钠、0.5%季按盐、2%苯酚、2%～3%次氯酸钠可迅速灭活裸露病毒，脱落伽皮中病毒很难被杀灭[10]。在阴暗潮湿环境中病毒可存活数月。

病毒可用羔羊和犊牛肾上腺细胞、睾丸细胞等原代细胞培养，也可在仓鼠肾细胞、牛肾细胞等传代细胞培养，主要在细胞浆内生长繁殖，病变产生慢，通常在接种后10 d出现。病毒可鸡胚培养，经绒毛尿囊膜途径，产生痘斑，但不致死鸡胚。该病毒超声波破坏细胞后，可释放病毒到细胞外。

2 流行病学

LSDV主要感染牛，各品种和日龄牛均易感，奶牛易感性高， 除牛外，家兔、绵羊、山羊、长颈鹿和黑羚羊等均可感染[11]，尚无人感染病例。该病潜伏期为2～5周，一般为28 d。该病一年四季均可发生，6～9月份高温、多雨季节为疾病高发期，多为散发。发病率在2%～45%，死亡率不超过10%，病牛病毒血症可持续12 d，康复后可获得终生免疫，血液可带毒3周以上，公牛感染后精液排毒长达5个月。病毒随病牛唾液、眼鼻分泌物、乳汁、精液、脱落伽皮等排出体外，污染周围环境及饲草、饮水等，通过消化道感染其它健康牛，也可通过蚊、蝇等吸血昆虫叮咬传播或污染的针头机械传播，还可以通过胎盘垂直传播。因痂皮内病毒很难杀灭，养殖场一旦爆发该病后，扑杀病牛，再次引入无免疫力牛时，半个月内很容易再次发病。

3 临床症状及病理变化

患病牛临床表现与个体状况和感染病毒毒株和剂量有关，临床表现通常为病牛精神沉郁、食欲减退，消瘦，呼吸困难，口腔有溃疡灶，流涎，眼鼻分泌物增加，流血性或脓性鼻涕，鼻镜干燥，眼角膜发生疼痛性溃疡病变，严重时导致失明，不爱运动，浅表淋巴结尤其是肩胛下淋巴结和股前淋巴结肿大。四肢及乳房部位水肿，体温升高至41 ℃以上，呈持续稽留热型。体温升高48 h后，病牛体表头颈部、乳房、外阴等皮肤出现直径1～5 cm结节，7 d后结节明显，小结节可自动消失，大结节破溃后可反复结痂，一般一月左右可恢复，个别病例会在皮肤上留下永久性疤痕。奶牛产奶量下降， 母牛出现流产，发情延迟等，公牛出现暂时或永久性不育。

剖检可见牛口腔及消化道黏膜出现溃疡和糜烂，心肌充血、出血，心脏肿大，肝脏肿大，边缘钝圆，胆囊肿大3倍，外表有出血点，气管内有黏液，肺脏出血、肿大，胃肠黏膜出血，肾脏表面有出血点，淋巴结出血、肿大，周围呈胶冻样浸润。

4 诊断

根据流行情况、临床症状及特征性病变可作出初步诊断，需要注意的是，得和一些类似的疾病做出鉴别诊断，如牛伪结节性皮肤病、嗜皮菌病，牛皮蝇感染，蚊虫叮咬、荨麻疹，牛丘疹性口炎。牛伪结节性皮肤病的结节主要是浅表性结节，临床表现一般较温和，病程短、病变轻微，症状与结节性型皮肤病早期症状类似。嗜皮菌病由刚果嗜皮菌感染引起，潜伏期2～7天，早期病变为浅表性非溃疡性表面结构。精神、食欲基本正常，一般1周内可自愈。牛皮蝇感染由牛皮蝇幼虫引起的疾病，可引起牛消瘦，产奶量下降，病牛瘙痒，恐惧不安和局部疼痛，影响牛的休息和采食在牛背部皮下可摸到长圆形的结节，皮肤上有小孔，结缔组织囊内可见幼虫。蚊虫叮咬和荨麻疹皮肤病变与LSD相似，但病变更浅、病程较短、病情较轻。牛丘疹性口炎病变仅发生在口腔黏膜。

如要进行确诊，最好采用实验室检测方法进行确诊，常用的实验室检测方法有病毒分离鉴定、透射电镜观察、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验、分子生物学检测方法等。病毒分离时可选取肺、脾、淋巴结等组织或皮肤结痂等样品，样品与生理盐水比例为1∶ 5研磨成混悬液，反复冻融3次，充分释放病毒，12 000 r/min离心3 min，取上清液0.22 μm滤器过滤除菌，接种易感细胞，出现细胞病变后用间接免疫荧光试验进行鉴定，也可用电镜观察病毒粒子特征。病毒分离耗时长，成本高。在疾病暴发期间，可用琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验等检测机体情况进行诊断，而在疾病安静期，很难通过血清学监测动物群状况，因此时以细胞免疫为主，并且当前可用的血清学检测敏感性低。分子生物学检测尤其是荧光PCR检测是当前病原临床快速检测的方法，已经广泛用于各种疾病快速检测，应用效果好，科研工作者已经开发出牛结节性皮肤病病毒荧光PCR检测试剂盒，检测时病料可选取皮肤结痂、唾液、鼻拭子、抗凝血等，样品要新鲜，及时送达实验室。

5 防控措施

对该病目前尚无有效的治疗措施，主要以疫苗接种免疫预防为主，国内无商品化LSDV疫苗，但可用山羊痘弱毒疫苗代替进行预防控制，一般5只份羊痘疫苗，皮内注射，一年一次，一旦从外地调牛，要尽快防疫羊痘疫苗。不从疫区引种，引种后要做好牛群隔离和检疫工作，隔离30 d，检验合格后才能混群饲养。提升牛场生物安全水平，禁止外来无关访客进场，如确需要进场者，至少隔离24小时后再进入。人员做好登记和消毒工作。场区门口设消毒池，消毒药定期更换，无关车辆不许进入场区。加强牛群饲养管理，饲喂优质营养全价饲料，保证牛只蛋白质、氨基酸、维生素等摄入充足，禁止饲喂霉变饲料，饮用清洁干净饮水[12]。禁止牛场内饲养猫、狗等其他动物，不同日龄牛群不要混养。开展灭蚊、蝇工作，消灭场内传播该病的其他吸血昆虫及幼虫，清理节肢昆虫易滋生的环境。场内做好防鼠措施，定期请专业人士开展灭鼠工作。场区内外及周边环境定期清理和消毒，减少环境中病原微生物含量，降低牛场感染率。牛舍以及周围环境要定期进行消毒，尤其是在发病高峰期或者存在疫情威胁的情况下，要增加消毒次数，且要注意定期更换消毒液的种类[13]。养殖生产一线人员定期做好相关培训，发现疑似病例后尽快诊断，及早上报。

牛场发病后，限制牛群移动，牛群全面监察排查。挑选病牛并隔离，同时对舍内及周围环境、器具等进行全面消毒，健康牛紧急接种10倍剂量的山羊痘病毒活疫苗皮内紧急接种免疫。上报上级兽医主管部门，按要求实行区域封锁和管制。病牛按规定扑杀，并进行焚烧活深埋等无害化处理。牛场环境全面彻底消毒。