王兆丰，许晓波，唐文潇，朱有才，胡继超，张新根

骨肉瘤是一种侵袭性的原始骨间充质肿瘤[1]。近年来尽管预后有所改善，但转移性或复发性骨肉瘤的临床治疗仍然具有挑战性，在过去的三十年里，治疗基本上没有改变[2]。目前的治疗方法主要包括手术切除和全身化疗（如阿霉素和顺铂）。然而，患者很快就会产生耐药性并复发。据报道，药物流入/流出蛋白的过度表达、DNA修复的增强和致癌信号转导通路的激活是骨肉瘤化疗耐药的原因[3]。因此，通过研究特异性致癌信号通路和致癌基因改善骨肉瘤的治疗与预后受到了广泛的关注。TRIM11 是TRIM家族的重要成员之一，研究表明TRIM家族的多个成员可通过Wnt/ -catenin、IFN、p53 等信号通路直接参与肿瘤的调控[4-5]。本研究旨在探讨TRIM11 基因对骨肉瘤细胞增殖与凋亡的影响，为骨肉瘤的治疗与预后提供新的依据。

1 资料与方法

1.1 材料与试剂 人骨肉瘤细胞株MG63、HOS、U2OS、Saos-2、143B 购自上海细胞库；TRIM11-SiRNA 骨肉瘤细胞株Saos-2 购自源井生物科技公司；胎牛血清（FBS）、DMEM 培养基、青链霉素购自Solarbio 公司；TRIM11 一抗、GAPDH 一抗、辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG 购自Proteintech 公司；Q-PCR试剂盒、ECL发光液、RIPA蛋白裂解液、CCK8 试剂盒购自上海碧云天公司；流式细胞仪、实时荧光定量PCR 仪、化学发光凝胶成像仪购自美国Bio-Rad 公司；超净工作台、大小型高速冷冻离心机购自常州诺基仪器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 采用含10%FBS、1%青链霉素的DMEM培养液培养成骨细胞和骨肉瘤细胞MG63、HOS、U2OS、Saos-2及143B。置于37℃5%CO2饱和湿度下对细胞进行培养，0.25%胰蛋白酶进行消化、传代，取对数生长期的细胞进行实验。……