曹利军，苏红专，孙璐，王宜娜，李洪英，刘登辉

脓毒症仍然是重症监护病房中的主要挑战，它以全身性炎症反应和多器官功能衰竭为特征[1]。肝脏被认为是脓毒症影响的第二大器官，在脓毒症的患者中，往往会出现肝功能的异常；但是，脓毒症引起的肝损伤一直被重症监护室的医师所忽视[2-3]。CD-200（cluster of differentiation 200）亦称OX-2，是新型免疫球蛋白超家族1 型跨膜糖蛋白，能够与CD200R1-4 结合。有研究证实，CD200/CD200R 信号通路在T 细胞反应的形成及维持中发挥着重要的负性调控作用，且参与T 细胞的分化和存活调控[4-5]。肝脏在多种疾病的免疫耐受中起了重要的作用，但使用CD200 阻断剂后，对于脓毒症相关性的肝损伤是否有保护作用及其可能的作用机制还不清楚。本研究旨在通过构建脓毒症肝损伤的模型，观察CD200 在小鼠肝脏组织的表达情况；探索抗CD200抗体对脓毒症小鼠肝损伤是否存在保护作用，并初步阐明其可能的作用机制。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 动物选取 C57BL/6 雄性小鼠（动物许可证号：SYXK（沪）2017-0004），年龄8 ～10 周，体质量22 ～30 g，购自海军军医大学实验动物中心。

1.1.2 主要仪器 L500 台式低速自动平衡离心机（湖南湘仪实验室仪器有限公司），OLYMPUSAU640全自动生化分析仪（日本OLYMPUS），电泳槽、转膜槽（Biorad 公司）。

1.1.3 主要试剂 anti-CD200 抗体（ab254193，Abcam 公司）；Isotype 抗体（重组抗小鼠IgG 抗体，ab190475）；ELISA试剂盒（ebioscience公司），RT-PCR试剂（TakaRa公司），p65 抗体（8242，CST公司）、phospho-p65 抗体（3031，CST 公司）、IB抗体（9242，CST公司）、phospho-IB抗体（9246，CST 公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 脓毒症肝损伤模型构建 采用七氟烷麻醉小鼠，选取腹部正中切口，腹部皮肤常规消毒，切开腹部中线1 ～2 cm，暴露盲肠，用丝线在回盲瓣下结扎，用22 号针头穿刺盲肠两次，以诱发腹膜炎，将穿孔的盲肠回纳腹腔，缝合切口，再次消毒皮肤，用无菌纱布包扎腹部。……