姜 媛，丁 宁，胡学军*

(1.大连大学医学院，辽宁 大连 116000；2.大连大学 医学研究中心，辽宁 大连 116622)

目前，重组蛋白已被广泛应用于临床治疗、医学检验、环境监测等领域[1]。低成本高效的纯化重组蛋白是蛋白生产的关键技术。通常采用各种色谱柱进行蛋白质纯化，该方法同时需要辅助设备，比如蛋白质分离纯化系统[2]。而类弹性蛋白多肽(elastin-like polypeptides，ELPs)的出现给纯化重组蛋白提供了新的途径。

1973年，Urry等发现天然弹性蛋白疏水区域中含有大量的Val-Pro-GIy-Val-Gly(VPGVG)重复氨基酸序列[3]。ELPs是根据重复五肽氨基酸序列人工合成的温度敏感的蛋白质聚合物(VPGVG)n，具有响应温度变化的可逆相变性质[4-6]。因此，近年来ELPs因其具有明显的可逆相变特性而备受关注[7]。ELPs在低于其可逆相变温度(inverse transition temperature，ITT)下可溶于水溶液，但在高于ITT时变成不溶性聚集体[8]。随机的单个ELPs链在达到ITT之前，随着温度的升高开始呈现β-转构象，接着是β-螺旋构象，然后在达到ITT时相互堆叠形成 “扭曲的细丝”并相互结合形成不溶性聚集体。此过程是可逆的，当温度降低到ITT以下时，聚集体重新溶于溶液中[9](图1)。

图1 ELPs可逆相变机理Fig.1 Inverse transition mechanism of ELPs

研究[10-13]发现，当ELPs基序与另一蛋白融合时，ELPs的可逆相变性质得以维持。由此推断ELPs允许重组蛋白的非色谱热刺激相分离。自此ELPs便作为纯化标签参与蛋白质纯化。虽然ELPs标签与现有纯化标签均可用于标准化重组蛋白的纯化过程，但现有纯化标签的一个共同缺点是：大多数依赖于亲和层析，成本较高，特别是大规模制备时。相比之下，ELPs标签的纯化过程简单而直接，可以显著降低重组蛋白的生产成本[14]。……