汤绮桐，曹伏君，叶 宁

(广东海洋大学 水产学院，广东 湛江 524088)

珍珠龙胆石斑鱼(Epinepheluslanceolatus♂×E.fuscoguttatus♀)，又名龙虎斑或珍珠斑，是雄性龙胆石斑鱼与雌性老虎斑杂交成的新品种石斑鱼。珍珠龙胆石斑鱼的肉质滑嫩鲜美，营养丰富，而且成长快速，个体大的体长可达50 cm。珍珠龙胆石斑鱼具有食性广、抗病能力强等优点。得益于海南育种研究人员的多年研究，珍珠龙胆石斑鱼已经可以进行规模化养殖[1]。

目前，国内对于珍珠龙胆石斑鱼的研究主要集中于养殖方式、生长发育情况、药物等方面[2]，而对于其造血器官中的血细胞发生的研究相对较少。笔者对珍珠龙胆石斑鱼血细胞的发生进行详细研究，以期为鱼类血细胞发生的研究提供更多的参考资料。

1 材料与方法

1.1 材料

试验珍珠龙胆石斑鱼购自湛江市荣成养殖场，共10尾，雌雄各半。购回后在室内养殖池内暂养1 d(曝气24 h的自来水，室温，充气泵增氧，不投饵料)。试验时选取健康状况良好、身体无外伤的个体。

1.2 方法

1.2.1 造血器官印迹片、涂片制备

拭净鱼体表，剖开胸腹腔，将鱼的头肾、体肾、脾脏取出，在0.65%鱼用生理盐水中洗去表面血渍，然后用滤纸吸干，用刀片将每个器官分别作横切、纵切4个断面，每个断面在洁净载玻片上轻轻印5个印迹面。每尾鱼各器官各作印迹片20张，待干后，瑞氏染液染色10 min，加入磷酸缓冲液浸泡10 min，用清水冲洗，晾干。中性树脂封片。各组织分别剪碎作涂片10张。

1.2.2 血细胞计数与测量

分别取头肾、体肾和脾脏各10张以上印片、涂片，每张印片、涂片随机取5个视野，对各细胞系按其发生的不同阶段进行形态描述，分类计数并计算百分比值。……