吴 凡，李惠杰，杨光宇，郭亚东，胡秋芬，梁梦洁

(1.云南民族大学民族医药学院，昆明 650504；2.云南中烟工业有限责任公司技术中心，昆明 650106；3.昆明医科大学药学院，昆明 650504；4.云南云天化股份有限公司研发中心，昆明 650228)

众所周知，吸烟可导致肺癌、呼吸系统疾病和心脑血管疾病等多种疾病，这是由于香烟烟雾是一种丰富的自由基来源，它通过活性氧(ROS)的直接传递和炎症细胞的激活促进ROS的内源性生成，产生氧化应激损伤。8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和8-羟基鸟苷(8-OHG)分别对应脱氧核糖核酸和核糖核酸的氧化损伤[1]，而且这两种化合物在体内化学稳定性好，其含量的测定可为有效评价机体的氧化损伤提供帮助，在疾病病理研究过程中常作为氧化应激的生物标记物[2-3]。

尿液可通过无创取样，因此样品易得。尿液中8-OHdG 和8-OHG 的测定可为有效，评价机体各种因素引起的氧化损伤提供关键数据，尿液中8-OHd G 和8-OHG 的测定在国内外引起了广泛的关注[4-5]。目前测定8-OHd G 和8-OHG 的方法有酶联免疫法、气相色谱-质谱法、电化学方法、高效液相色谱-串联质谱法等[6-8]。其中，高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)选择性好、灵敏度高，在8-OHd G 和8-OHG 测定中得到了广泛应用[9-14]。但尿液样品基质复杂，样品前处理需用固相萃取、液液萃取、柱层析等方法进行净化，而且尿液样品取样后需超低温冷冻保存，试验前需解冻后才能进行前处理。尿液样品的前处理不但操作繁琐，而且引入误差的因素较多。因此，寻找高效、简便的8-OHdG和8-OHG 测定方法十分必要。

本工作自主设计了样品离心分离和过滤装置对尿液样品进行前处理，并结合高效液相色谱-串联质谱法分别测定不同吸烟者尿液样品中的8-OHd G和8-OHG，两种化合物在4.5 min内可达到完全分离。……