张 序 张秀姣 马永鹏 李正红 万友名 马 宏*

（1. 中国林业科学研究院资源昆虫研究所，昆明 650233；2. 南京林业大学林学院，南京 210037；3. 中国科学院昆明植物研究所，云南省极小种群野生植物综合保护重点实验室，昆明 650201）

宽杯杜鹃（Rhododendron sinofalconeri）系杜鹃属（Rhododendron）常 绿 杜 鹃 亚 属（Subgen.Hymenanthes）常绿杜鹃组（Sect.Ponticum）杯毛杜鹃亚组（Subsect.Falconera）常绿植物，分布于中国云南东南部及越南北部［1］。其花色为杜鹃属植物中少见的黄色，钟状花冠簇生于枝顶，缀以褐色斑点状花药，具有较高的观赏价值，同时也是难得的育种亲本。

近年来，由于道路建设、农田开垦和修建风力电站等人类活动，宽杯杜鹃野生种群遭到直接破坏，生境破碎化和人为采挖现象严重。种群年龄结构极度失衡，绝大多数为老年个体，偶见幼苗，为典型的衰退性种群；加之宽杯杜鹃对生境的海拔（＞2 600 m）、湿度等要求高，其面临着较大的灭绝风险。《杜鹃红色名录》将其收录为易危物种［1］。根据IUCN（3.1 版）［2］标准和野外调查结果，我们将其提升为极危等级［CR B1b（iv，v）c（iii，iv）］。遗憾的是，有关宽杯杜鹃的研究仅见花粉储藏活性方面［3］。因此，开展宽杯杜鹃保护生物学研究已刻不容缓。

新一代测序技术（next-generation sequencing，NGS）的快速发展提高了单核苷酸多态性（singlenucleotide-polymorphism，SNP）的发现效率，展现出高通量SNP 基因分型在植物分子生物学研究的潜力。基因分型（genotyping-by-sequencing，GBS）技术是一种基于NGS 技术的SNP 基因分型方法。简化的GBS 需要限制性内切酶在测序前消化DNA，以生成简化的表示库。由于参考基因组的可用性并不是实施GBS 的必要条件，而且成本较低、实验操作相对简单，高通量测序获得的含量SNP 携带丰富的全基因组信息，因而已广泛用于植物遗传多样性分析、系统进化、分子标记定位和遗传图谱构建等研究［4～6］。……