刘 涛，王 瑞

(信阳农林学院，河南 信阳 464000)

0 引言

茶皂素属于皂素类，是由茶叶籽提取出来较复杂的糖式化合物，同时也是一种良好的表面活性剂。茶皂素的应用开发非常广泛，在日用化工、医药、养殖上均有应用。研究将茶皂素配制成不同浓度试剂，研究其对豫南地区分离到的猪源大肠杆菌、链球菌、葡萄球菌及沙门氏菌的抑菌效果，为开发茶皂素抑菌试剂提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

试验菌种由信阳农林学院预防兽医实验室保存；茶皂素(60%)购自山东优索化工科技有限公司；营养琼脂培养基、LB营养肉汤培养基、麦康凯琼脂培养基、葡萄球菌选择性琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂购自青岛海博生物有限公司。

1.2 仪器设备

超净工作台(SW-CJ-2F， 苏州净化有限公司)、恒温生化培养箱(250B，常州市华普达教学仪器有限公司)。

1.3 茶皂素抑菌效果测定

1.3.1 菌种的活化

将实验室保存的大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、链球菌菌种接种到相应的培养基上，放置于37℃恒温培养箱培养18～24 h。

1.3.2 细菌形态学观察

将活化好的大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、链球菌进行革兰氏染色，镜检。

1.3.3 药敏片制备

取双圈定性滤纸用打孔器打成6 mm直径的纸片备用。每10片放置于洁净青霉素瓶中，然后用干净纱布封口，经121℃高压20 min灭菌，再放入37℃恒温生化培养箱烘干直至干燥。称取0.5 g、0.6 g、0.7 g、0.8 g、0.9 g、1 g、1.5 g茶皂素，分别加1 mL灭菌蒸馏水进行溶解，将溶解后的茶皂素溶液缓慢倒入装有药敏片的瓶中。

1.3.4 菌悬液制备与含菌培养基制备

菌悬液的制备：将大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、链球菌用灭菌接种环挑取单个菌落，分别选取3支试管对细菌进行倍比稀释。……