杨光，惠越，陈奎，王伟，饶楚炳

1.湖北医药学院附属东风医院，湖北 十堰 442000； 2.十堰市太和医院，湖北 十堰 442000

骨性关节炎(osteoarthritis，OA)是常见于老年人群体中的一种慢性退行性关节疾病，其发病率随年龄的增长而升高，主要的病理改变表现为关节软骨缺损及软骨下骨质增生[1-2]。目前OA的发病机制依然不够清楚，但氧化应激、炎症因子、维生素D、肥胖等因素都被证明是OA的危险因素[3-4]，其中炎性因子诱发的软骨细胞外基质的过度降解和软骨退化被认为是OA的主要因素[5]。苍术内酯II(atractylenolide II，AT-II)是从中药白术中分离的1种倍半萜烯，具有很好的抗炎、抗癌[6-8]及口服生物利用度，常用于治疗黑色素瘤[9]。目前鲜有AT-II用于OA治疗的相关研究。本研究通过木瓜蛋白酶制成OA大鼠模型，并用不同浓度AT-II处理3周后，观察AT-II对各组大鼠软骨损伤、细胞凋亡、炎症反应及氧化应激等过程的调控机制，以期为AT-II治疗OA提供相关理论依据。

1 材料

1.1 动物SPF级8～10周龄雄性SD大鼠30只，体质量260～280 g，购于武汉大学动物实验中心，动物合格证号：SCXK(鄂)2019-0004，饲养于十堰市人民医院SPF级饲养环境，许可证号：SYXK(鄂)2017-0098，培育室温度20～25 ℃，湿度保持在65%～70%，进行人工光照(12 h/昼、12 h/夜)。

1.2 药品与试剂苍术内酯II(中国食品药品检定研究院，货号180508)；兔抗MMP-13、Coll-II、Aggrecan、Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2、Bax、p-P65、P65、P-STAT3、STAT3、GAPDH多克隆抗体(美国Abcam公司，货号：180622、180509、180429、180713、180613、180521、180729、180524、180603、180512、180719、180515)；超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、丙二醛(monochrome display adapter，MDA)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)、谷胱甘肽(glutathione，GSH)试剂盒(武汉博士德生物技术有限公司，货号分别为：180118、180213、180321、180312)；肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor，TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10，IL-10)试剂盒(上海高创化学科技有限公司，货号分别为：170428、170524、170324、170329)；总RNA提取试剂盒、反转录试剂盒及荧光定量PCR试剂盒(北京庄盟国际生物基因科技有限公司，货号分别为：ZP401、ZR102、ZF201)；……