彭 燕，郑细闰，刘红英，何青莲，郑广娟

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一[1]。术前新辅助化疗在局部晚期乳腺癌患者的治疗中发挥了重要作用，并取得了较好的临床疗效[2]。HER-2是位于17号染色体上的跨膜蛋白，具有跨膜酪氨酸激酶活性，10%～25%的乳腺癌组织中可以检测到HER-2蛋白过表达[3-4]，因此HER-2基因在乳腺癌发生、发展过程中发挥了重要的作用。目前，临床常用的检测方法主要为免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)及荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization, FISH)，虽广泛运用但仍存在一定判读问题[5]。微滴式数字PCR(droplet digital PCR, ddPCR)是一种检测核酸分子的绝对定量技术，其运用直接的计数目标基因和参照基因(已知拷贝数)数目，通过计算其比值，就可得到目标基因的拷贝数[5]。本实验利用ddPCR技术检测乳腺癌新辅助化疗前后的HER-2扩增情况，并与IHC联合FISH检测这一传统检测方法进行结果对比，验证ddPCR检测的可行性，为临床选择该检测方法提供可靠性。

1 材料与方法

1.1 临床资料本实验通过广州中医药大学第二附属医院住院病历系统及朗伽病理系统收集了确诊为乳腺浸润性导管癌患者62例(术前均未接受放、化疗及内分泌治疗、靶向药物等新辅助治疗的穿刺活检组织和经过规范新辅助化疗后的手术根治标本)纳入实验，编号为1、2、3……62，患者均为女性，年龄28～82岁，平均(52±12.85)岁。

1.2 仪器与试剂常规仪器有全自动免疫组化仪、StatSpin杂交仪，Droplet Digital PCR系统、T100热循环仪、PX1 PCR plate Seale及微滴控制分析软件。试剂主要有Ultra View DAB检测试剂盒和HER-2抗体均由罗氏诊断公司提供，FISH检测试剂盒由北京金菩嘉医疗公司提供，ddPCR试剂盒由伯乐生命医学产品(上海)公司提供。