谢乐斯，赵 盼，周 虹，王 炜，项晶晶

结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于肺癌、乳腺癌和前列腺癌[1]，近年我国结直肠癌的发病率和病死率均呈逐年升高趋势。目前，错配修复(mismatch repair, MMR)蛋白功能缺失在结直肠癌的风险评估、诊断和预后判断中的意义已多有报道，其与85%的遗传性非息肉病性结直肠癌(Lynch综合征)及15%的散发性结直肠癌相关，具有重要的临床意义，而RAS(KRAS和NRAS)突变状态与临床病理特征的相关性尚存争议。本文着重探讨4种MMR蛋白(MSH2、MSH6、MLH1、PMS2)表达以及RAS(KRAS/NRAS)突变状态与结直肠癌临床病理特征的关系及应用价值。

1 材料与方法

1.1 临床资料收集2016年1月～2019年11月浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院诊治的186例结直肠癌患者，其中男性109例，女性77例；年龄20～88岁(64.54±11.21岁)；结肠癌96例，直肠癌90例。所有病例的病理切片均经两位资深病理医师重新复诊，包括复阅HE切片和诊断，统计肿瘤的组织学类型、发生部位、分化程度及肿瘤分期等临床病理特征。按WHO(2019)消化系统肿瘤分类标准进行分类，依据国际抗癌联盟(UICC)第8版肿瘤TNM分期系统进行肿瘤分期。纳入标准：术前未行放、化疗和抗肿瘤药物治疗；临床病理资料均完整。

1.2 方法

1.2.1免疫组化 标本均经10%中性福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋，4 μm厚切片，HE染色。使用DAKO公司Link48型自动免疫组化仪进行免疫组化EnVision两步法染色。MSH2、MSH6、MLH1和PMS2抗体均购自广州安必平公司。每批染色均设立已知阳性对照，并用PBS代替一抗作为阴性对照。MSH2、MSH6、MLH1及PMS2阳性均定位于细胞核。肿瘤周围的正常上皮细胞、肿瘤内浸润的淋巴细胞、间质细胞出现细胞核阳性着色可作为内对照。……