718例浸润性乳腺癌分子分型中CK5/6和EGFR的表达及临床病理分析
2021-03-17陶玉梅任晓燕袁明明陈婷婷金晓霞卫颖泽杨书云
陶玉梅,任晓燕,袁明明,陈婷婷,金晓霞,卫颖泽,杨书云,何 松
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,具有高度异质性。根据2019 St. Gallen国际共识[1],采用免疫组化替代基因表达谱分析(gene expression profiling, GEP)可将浸润性乳腺癌(invasive breast carcinoma, IBC)分为四个亚型:Luminal A型、Luminal B型、HER-2过表达型以及三阴型。基底样乳腺癌(basal-like breast carcinoma, BLBC)是三阴型乳腺癌(triple negative breast carcinoma, TNBC)的一种亚型[2]。本文通过对718例IBC进行回顾性分析,以期为IBC,特别是TNBC的临床治疗提供研究数据。
1 材料与方法
1.1 材料收集2015年1月~2017年12月南通市肿瘤医院病理科存档及会诊的IBC标本718例,患者年龄22~89岁,中位年龄53岁,均为女性。由两名有经验的病理医师采用双盲法重新阅片,组织学分型标准参照WHO(2019)乳腺肿瘤分类,组织学分级参照Elston&Ellis法,分子分型采用免疫组化替代分型,标准参照2019 St. Gallen乳腺癌会议国际共识[1]:将ER阳性≥1%,PR阳性>20%,Ki-67增殖指数<30%且HER-2阴性定义为Luminal A型;Luminal B型分两种情况,一种是ER阳性,Ki-67增殖指数≥30%或PR阳性<20%,HER-2阴性,另一种是ER阳性,PR阳性,任何水平的Ki-67增殖指数,HER-2阳性;将ER阴性,PR阴性,HER-2阳性定义为HER-2过表达型;将ER、PR及HER-2三者均阴性定义为三阴型。所有患者术前均未行放疗、化疗等任何治疗。
1.2 试剂一抗ER(EP1/兔单克隆抗体,稀释度1 ∶400),PR(EP2/兔单克隆抗体,稀释度1 ∶1 200),EGFR(EP22/兔单克隆抗体,稀释度1 ∶200),均购自北京中杉金桥公司,HER-2(A0485/兔多克隆抗体,稀释度1 ∶800),CK5/6(D5/16 B4/鼠单克隆抗体,稀释度1 ∶600),Ki-67(MIB1/鼠单克隆抗体,稀释度1 ∶600)及EnVision试剂盒,均购自DAKO公司。
1.3 方法标本均经10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,4 μm厚切片,免疫组化染色采用EnVision两步法,Ki-67使用柠檬酸盐修复液进行抗原修复,其余指标均采用EDTA修复。所有病例均设阳性和阴性对照。ER、PR以子宫内膜作为阳性对照,HER-2以已知阳性乳腺癌作为阳性对照,Ki-67、EGFR以阑尾作为阳性对照,CK5/6以正常皮肤作为阳性对照,PBS代替一抗作为阴性对照。
1.4 结果判定在IBC区域肿瘤细胞出现定位明确的棕黄色或棕褐色颗粒判定为特异性阳性反应。E……
