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鳗鲡疱疹病毒ORF8基因的克隆表达及转录时相分析

2021-03-13陈曦李英英陈强宋铁英葛均青

大连海洋大学学报 2021年1期
关键词:分析

陈曦,李英英,陈强,宋铁英,葛均青

(福建省农业科学院生物技术研究所,福建 福州 350003)

福建省是鳗鲡Anguillidsp.养殖大省,鳗鲡产值在该省水产品贸易中占重要地位,因此,对鳗鲡疫病的研究尤为重要。鳗鲡疫病的病原有病毒性、细菌性、寄生虫等,目前对其病毒性疾病缺乏有效防控措施。该类疾病暴发时,常呈现出大范围的区域传播态势,给养殖行业造成了巨大的经济损失[1]。“脱黏败血综合征”是养殖鳗鲡白仔、黑仔阶段普遍发生的一种传染性疫病,自20世纪90年代就普遍发生。本试验在前期研究中,利用鳗鲡卵巢细胞系(Eel ovary, EO)从病料中分离出鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AngHV),流行病学致病性分析表明,AngHV就是鳗鲡“脱黏败血综合征”的致病病原[2]。

AngHV为线性双链DNA病毒,隶属于鱼蛙疱疹病毒亚科Alloherpesviridae鲤疱疹病毒属Cyprinivirus[3]。目前,鲤疱疹病毒属中研究较多的包括对鲤科鱼类危害较大的鲤疱疹病毒Ⅱ型(cyprinid herpesvirus 2, CyHV-2)和鲤疱疹病毒Ⅲ型(cyprinid herpesvirus 3, CyHV-3)等病毒,并已开展了病原学、流行病学、感染机制、诊断及防控等方面的研究[4-5],但基因功能方面的研究较少。基因序列分析表明,AngHV与CyHV-3的遗传距离最近,有40个同源基因,但序列的一致性均较低,仅为19%~58%。因此,有必要对AngHV基因开展深入研究。

AngHV基因组全长248.5 kbp,由一段长序列及两侧11 kbp末端重复序列组成,具136个开放阅读框(ORF)[6-7]。其病毒粒子由核衣壳、间质层和囊膜组成,预测含有7个衣壳蛋白、11个囊膜蛋白和22个被膜蛋白[8]。囊膜蛋白作为重要的结构蛋白,与病毒入侵宿主细胞、胞间传递、组织嗜好性及宿主范围等方面密切相关[9-12],也常常被用来开发基因工程疫苗[13-14]。……

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