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猪源奇异变形杆菌的分离鉴定、耐药性分析及毒力基因检测

2021-03-10黎娜铭王彬舒正强曾智勇黄涛汤德元吴学祥

畜牧与兽医 2021年3期
关键词:耐药小鼠

黎娜铭,王彬,舒正强,曾智勇,黄涛,汤德元,吴学祥

(1. 贵州大学动物科学学院,贵州 贵阳 550025;2. 贵州省独山县麻尾镇人民政府,贵州 独山 558206;3. 贵州省黔西南州农业农林局,贵州 兴义 562400)

奇异变形杆菌是广泛分布于自然界、动物粪便、临床标本以及人和动物肠道内的重要条件致病菌,主要以其在琼脂平板上成群分化的模式以及与尿路感染患者肾结石的发展相关而闻名,可引起人和动物尿路感染、胃肠炎和败血症等[1-2]。奶牛、羊、火鸡、鹅和虎等多种动物被奇异变形杆菌感染,可引起肺炎、腹泻、关节炎等症状[3-7]。奇异变形杆菌能引起猪腹泻、败血症等[8-10],给养猪业造成较大的经济损失。本试验对病死猪内脏分离菌进行形态特征、生化特性鉴定,初步鉴定该分离菌为变形杆菌,通过16S rRNA基因序列分析,从分子水平确定该分离菌为奇异变形杆菌,并对其进行耐药性分析、毒力基因检测和小鼠攻毒试验,旨在为该苏感染的防治及其分子流行病学研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 病料来源及实验动物

病料来源于贵州某屠宰场突发死亡猪的心、肝、脾、肺和肾等内脏器官;实验动物为6~8周龄SPF昆明小鼠,购自辽宁长生生物技术股份有限公司。

1.2 主要试剂

细菌基因组DNA提取试剂盒购自天根生化科技(北京)有限公司;PremixTaq(TaKaRaTaqVersion 2.0 plus dye)购自宝生物工程(大连)有限公司;DL2000 plus DNA Marker购自南京诺唯赞生物科技有限公司;鲜血培养基购自广东环凯微生物科技有限公司;麦康凯培养基、胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)和胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)购自海博生物技术有限公司;……

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