余波，李婷，徐景峨，张亚楠，姜玲玲，周思旋，卜仕金

(1. 扬州大学兽医学院/江苏省动物重要疫病与人畜共患病防控协同创新中心，江苏 扬州 225009；2. 贵州省农科院畜牧兽医研究所，贵州 贵阳 550005)

鸭疫里氏杆菌病是由鸭疫里氏杆菌(Riemerellaanatipestifer，RA)感染引起的一种急性、败血性传染病[1]。鸭、鹅等水禽易通过呼吸道和皮肤伤口途径感染，该细菌通过侵入血液，产生毒素，造成组织器官损伤。细菌的荚膜还能侵染幼龄动物的脑组织，引起神经性症状。RA主要导致的病变特征为肝周炎、气囊炎和纤维素性心包炎，统称为“三炎”，还伴有干酪性输卵管炎、关节炎和脑膜炎等[2-3]。引起雏鸭的发病率和死亡率高，严重危害水禽养殖业的发展[4]。

RA血清型多且各血清型之间缺乏交叉保护，使得不同地区、同一地区的不同时段存在多种血清型或亚型的混合感染[5-6]。目前主要通过地区流行的优势血清型分离株所研制的灭活疫苗来防控RA感染。由于临床长期使用抗生素，致使RA易产生多重耐药性，给该病的防治带来很大困难[7]。鉴于处膜蛋白A(OmpA)在分离的RA菌株间具有高度保守性，不同血清型菌株OmpA蛋白之间存在交叉免疫原性，可制成一种针对多血清型的RA疫苗[8]。本研究旨在构建OmpA真核表达质粒，同时验证其在DF-1细胞中的表达及其对雏鸭的免疫保护效果，为进一步开发和研制RA新型基因工程疫苗奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试剂

阳性质粒pUC57-OmpA由上海生工生物公司构建；pVAX1真核表达载体由贵州大学动物科学学院鲜思美老师馈赠；……