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牛病毒性腹泻病毒E2蛋白纳米抗体筛选及反应原性检测

2021-03-10李岩肖盛中杨艳张彦红蔡卓轩周子恒张哲盛金良

畜牧与兽医 2021年3期

李岩,肖盛中,杨艳,张彦红,蔡卓轩,周子恒,张哲,盛金良

(石河子大学动物科技学院,新疆 石河子 832003)

牛病毒性腹泻黏膜病(bovine viral diarrheamucosal disease,BVD-MD),是由牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV) 引起的牛等多种动物感染的一种重要传染性疾病。BVDV感染牛后,牛群出现不同程度的临床症状,可造成严重的消化系统、生殖系统、呼吸系统疾病及免疫抑制等[1-2]。该病呈世界性分布,中国、美国、阿根廷、欧洲等已普遍报道,许多养牛业发达国家均存在该病[3]。

BVDV是黄病毒科(Flaviviridae)瘟病毒属(Pestivirus)的成员[4-5],为一种单股 RNA,有囊膜的病毒,呈圆形,与猪瘟病毒和羊边界病毒为同属病毒[6]。BVDV基因组是由一个开放阅读框(open reading frame, ORF)构成的单股正链RNA[7]。根据基因组的编码和翻译,BVDV中至少包含11个成熟蛋白,包括4种结构蛋白C、Erns、E1、E2,7种非结构蛋白Npro、P7、NS2-3、NS4A、NS4B、NS5A、NS5B[8]。BVDV-E2蛋白通常可以诱导机体产生具有特异针对性的抗体,其产生的抗体往往可以中和该病毒,从而在某种程度上避免了同源毒株的攻毒和对细胞的破坏[9]。E2蛋白能够参与并介导免疫中和反应,也是病毒与宿主细胞进行识别和吸附的主要部位[10-11]。该蛋白的基因容易发生变异,因此其保守性较低,是BVDV变异较高的结构蛋白,使病毒对环境有较好的适应性[12],同时这也是导致持续性感染和疫苗保护性差的主要原因[13]。

在骆驼科动物体内,除了传统的IgG抗体以外,还存在一种天然缺失轻链和重链第一个恒定区的特殊IgG,被称作重链抗体[14]。纳米抗体的大小仅是普通IgG抗体的1/10,且结构稳定、分子量小,可以在细胞内表达,借助穿膜肽还可以透过细胞膜,具有开发成为新型抗病毒药物的潜力[15]。……

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