莫家金 聂 璐

1.广东省罗定市人民医院检验科，广东罗定 527300；2.广东省佛山市第一人民医院，广东佛山 528010

近年来随着抗生素的广泛使用，细菌对抗生素的耐药性也不断提高[1]。耐碳青霉烯G-杆菌（CRGNB）是一种超级细菌，目前临床针对CRGNB的分离效率提升，但是这种细菌对碳青霉烯类广谱抗生素有着非常强的耐药性[2]。这种细菌耐药性不断上升以及快速传播成为当前临床预防和控制CRGNB感染的重要研究课题[3]。本文选取罗定地区作为研究对象，分析临床CRGNB常见碳青霉烯酶基因检测及流行病学，为CRGNB感染预防提供科学临床参考依据，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 菌株材料的收集

选取罗定地区作为研究对象，收集罗定地区2019年5月至2020年6月临床CRGNB共计150株。主要包括大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等6种细菌。所有菌株采用法国梅里埃生物科技有限公司生产的微生物检测仪Vitek-2（生产批号为VK2C7499）检测，将分纯后的菌株储存在脱脂牛奶管中，并放置在零下20 ℃的环境中保存。

1.2 实验试剂和仪器

（1）水解酪蛋白培养基干粉：美国BD公司。（2）甘油冻：difco公司。（3）胰蛋白胨：difco公司。（4）酵母提取物：美国BD公司。（5）NaCl（AR）：法国 Bio-Meriuex公司。（6）DNA Marker、PCR 反应链以及Taq酶：法国Bio-Meriuex公司。（7）PCR引物：由上海生工生物工程公司和invitrogen公司合成。（8）主要仪器：PCR在PTC-200型PCR（MJ Reserch）仪上进行。（9）ABI PRISM自动测序仪：美国应用生物系统（ABI）公司，批号3730XL。（10）微生物检测仪Vitek-2：法国梅里埃生物科技有限公司，生产批号为VK2C7499。

1.3 实验方法

1.3.1 改良Hodge实验 先采用无菌生理盐水将大肠埃希菌悬液调至0.5 mcf，按照1∶10稀释，然后将菌液接种在琼脂平板上干燥5～10 min，采用10 μg厄他培南纸片，挑取3～5种待测菌种接种，如果被测菌株与大肠埃希菌抑菌交汇处出现大肠埃希菌生长增强，即产生碳青霉烯酶[4]。……