免疫层析技术及应用的研究进展
2021-03-09李雨芮刘晓雅张文劲陈颖钰郭爱珍胡长敏
李雨芮,刘晓雅,张文劲,陈颖钰,2,郭爱珍,2,胡长敏,2*
(1.华中农业大学 动物医学院,湖北 武汉 430070;2.华中农业大学 农业微生物学国家重点实验室,湖北 武汉 430070)
胶体金(colloidal gold)作为一种用于免疫学研究的标记物,最早由FAULK等[1]于1971年在试验中标记兔抗沙门菌血清制备得到金标抗体,成功地检测出沙门菌表面抗原而提出。1974年ROMANO标记马抗人IgG的成功使得间接免疫金染色法首次被用于实践,免疫胶体金技术开始高速发展。自20世纪70年代始,陆续出现了多种以胶体金技术为基础、在光镜及电镜水平上与银显影和彩色免疫金银染色相结合的技术,使得胶体金免疫诊断有了许多新的应用和发展[2-4]。当前,在兽医临床快速诊断中的应用较多的主要是胶体金免疫层析法(colloidal gold enhanced immunochromatography assay,GICA)以及快速斑点免疫金渗滤法(dot-immunogold filtration assay,DIGFA),两者的区别主要在于GICA的待测样品由于毛细作用在微孔膜上采取平行于膜的方向移动,又称作侧向层析免疫层析法(lateral flow immunoassay,LFIA);而DIGFA的待测样品则是基于渗滤作用在微孔膜上垂直于膜运动,又称穿流式(flow through)固相膜免疫层析法[5]。免疫胶体金技术由于成本较低、样品处理简单、操作方便易行、反应迅速的同时还兼具灵敏方便等优点,在生产实际及生活中应用广泛。
随着各类新技术的发展,免疫层析技术也在不断更新换代,出现了可以一次检测多个对象及多个检测线的试纸条;标记物的改良使得结合垫上的标记物多种多样,纳米微粒、荧光微球、量子点等标记物逐渐被开发利用;同时,样品垫上添加的检测物也不局限于经典的血清等体液成分,核酸扩增等反应的产物也开始作为试纸条的检测对象,免疫层析技术迎来了新的发展篇章。……
