蒋 华 穆玉明 王春梅 周贤惠 张 健

1.成都大学附属医院老年病科，四川成都 610081；2.新疆医科大学第一附属医院超声医学中心心脏超声诊断科，新疆乌鲁木齐 830011；3.新疆医科大学第一附属医院心脏中心，新疆乌鲁木齐 830011

靶向超声造影剂是近年来超声医学领域研究的热点之一。超声靶向微泡破坏（ultrasound-targeted microbubble destruction，UTMD）是一种非病毒载体的基因转染方式，其具有操作简单、安全快捷、靶器官高度特异性等优势，可用于心肌基因治疗[1-3]。

研究表明[4]，迷走神经张力异常与阵发性房颤的发生密切相关，阻断迷走神经可以降低房颤的发生率[5]。G 蛋白信号转导途径通过调控自主神经活性从而达到诱发和维持房颤发生的作用。Gαi2C-末端肽段（Gαi2C-terminal peptide，Gαi2ctp）可以干扰Gαiβγ 三聚体的解离，阻断G 蛋白信号转导途径，降低自主神经介导的房颤发生[6-7]。故本研究采用静电吸附法将其连接到造影剂SonoVue 微泡表面，并量化寻找最佳携带剂量，利用UTMD 提高其到达心脏的效率，从而为Gαi2ctp 成功转导至体内发挥其生物学效应奠定基础。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器

超声微泡造影剂SonoVue（意大利BRACCO，15A022A）；荧光标记的Gαi2ctp[5-羧基四甲基罗丹明（5-TAMRA）-Gαi2ctp，广州特立生物科技有限公司特约合成]；流式细胞仪（美国，Beckman Cytometer GALLIOS）；漩涡混合器（广州，IKAMS-3）；荧光倒置显微镜（德国，LEICA CTR6000）；彩色多普勒超声诊断仪（美国，GE VIVID 7 DIMENSON）。

1.2 Gαi2ctp 靶向微泡的制备及分组

采用静电吸附法制备靶向微泡，根据Aistrup 等[6]的研究结果，将5-TAMRA-Gαi2ctp 分为0.5、1.5、3 mg/L三组，生理盐水溶解后与SonoVue 微泡混悬液混和，室温下充分混匀，调整pH 值至4.5，漩涡混合器振荡约1 min，室温下孵育、静置。……