山茶籽对雌激素缺乏AD大鼠脑组织形态、β淀粉样蛋白及学习行为能力的影响
2021-03-05周善金李海顾建忠韦福相邱迎均潘春玲黎飚方晓燕
周善金 李海 顾建忠 韦福相 邱迎均 潘春玲 黎飚 方晓燕
(右江民族医学院组织胚胎学教研室,广西 百色 533000)
阿尔茨海默病(AD)患病率随着年龄增大明显升高,老年女性发病率更高,临床表现更重。沉积于海马区β淀粉样蛋白(Aβ)引起思维、语音中枢的损伤是AD的病因之一〔1~3〕。本研究主要观察山茶籽提取物对雌激素缺乏AD模型鼠的学习行为能力、对应组织的Aβ沉积的影响,为临床防疗AD提供新的治疗方案,无毒高效地提高AD女性患者生活质量,使茶麸变废为宝,为广大山区脱贫绿色生态产业带来经济效益和社会效益。
1 材料与方法
1.1实验动物饲养 SD大鼠,SPF级5月龄雌性大鼠32只,体重(350±10)g。在室温(25±3)℃、灯光每12 h 进行交替,相对湿度58%的条件中给予全效颗粒饲料喂养,自由饮水。
1.2雌激素缺乏AD大鼠模型的建立 取24只大鼠在麻醉条件下(10 g/L 戊巴比妥钠通过腹腔注射,3.0 mg/kg),常规消毒,切掉两侧卵巢,缝合创口。切片镜下鉴定切除组织块为卵巢。术后创口处用链霉素治疗3 d,避免创口感染。去卵巢后2 w,按上述方法麻醉(3.0 mg/kg),固定于脑定位器上,头颅正顶部中央切前囟口暴露脑组织,以前囟为中心,向后4.3 mm、再旁开2.1 mm两边为穿刺点,打孔钻开颅骨。距离脑膜表面针入3.0 mm到达海马区双侧,用Aβ25~35 1 μl(含量为10 μg)缓缓注入海马区双侧,留针片刻(5 min),使Aβ25~35充分局部浸润。③造模大鼠颅内注射3 d后,再用D-半乳糖腹腔注射,注射液用D-半乳糖(100 mg/kg)+生理盐水稀释至2 ml,1次/d,连续2 w。对照组大鼠与去卵巢+D-半乳糖联合造AD模大鼠的摘除卵巢的手术操作过程一样,不同是切除卵巢附近一块脂肪组织,同样定位开颅,在相应部位注射等量盐水,没有注射Aβ25~35。……
