刘意 金湘东 贾宝辉 马宇 许丽敏

(1郑州铁路职业技术学院医学技术与工程学院，河南 郑州 450052；2郑州大学第五附属医院眼科；3郑州大学第一附属医院眼科)

糖尿病(DM)是一种高糖引起的血管慢性病变代谢病，其临床症状以并发症为主，包括糖尿病视网膜病、糖尿病肾病〔1,2〕。糖尿病性视网膜病变(DR)是世界失明人群的主要原因〔3,4〕，因此针对其高效低毒药物的研发具有重要意义。石斛(Dendrobii Herba)是一种传统的中草药，具有悠久的抗DM临床应用历史〔5〕，但关于石斛酚抗DM活性知之甚少。石斛或石斛酚具有抗细胞毒、抗转移的保护作用〔6〕，但其在DM引起的视功能障碍中的作用及机制尚未有报道。AKT的一般途径称为磷酸肌醇-3-激酶-蛋白激酶(PI3K-PK)B/Akt途径或PI3K/AKT/mTOR途径，以其涉及的上游和下游蛋白命名〔7〕。本研究通过建立高糖诱导的视网膜血管内皮细胞模型，观察石斛酚治疗对其凋亡、氧化应激的影响。

1 材料与方法

1.1材料 视网膜血管内皮细胞HREC购自ATCC；EGM2-MV内皮细胞培养基购自瑞士Lonza公司；石斛酚(批号：809AKR1B101)购自Prospec Tany Technogene Itd；超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)测定试剂盒、丙二醛(MDA)检测试剂盒、活性氧(ROS)检测试剂盒均购自大连碧云天；膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)和碘化丙啶(PI)试剂盒购自北京索莱宝公司。胎牛血清、四甲基偶氮唑蓝(MTT)、胰蛋白酶均购自美国Sellect公司；十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)试剂盒、ECL发光液、RIPA蛋白裂解液、二喹啉甲酸(BCA)蛋白定量试剂盒、逆转录试剂盒购自大连Takara公司；聚偏氟乙烯(PVDF)膜购自德国罗氏诊断有限公司。……