辛欣 綦成 王昕

(1山东大学第二医院口腔科，山东 济南 250000；2济南市口腔医院牙周黏膜病科)

口腔鳞状细胞癌(OSCC)具有侵袭能力强及恶性程度高等特点，由于OSCC患者极易发生淋巴结转移导致手术治疗效果差〔1〕。随着现代医疗水平的不断提高，可采用根治性手术辅助放化疗及靶向治疗等手段治疗OSCC，但由于OSCC发病机制尚未完全阐明导致治疗后患者生存率低及预后差〔2〕。因而探究OSCC细胞增殖及侵袭的生物学行为并寻找OSCC发生及发展相关的分子标志物可为靶向治疗提供新方向。微小RNA-184(miR-184)在口腔鳞癌细胞中高表达，抑制miR-184表达增加药物敏感性〔3～5〕。然而，miR-184表达变化对OSCC细胞增殖及转移的分子机制仍未可知。用靶基因预测网站预测出ZNRF3可能是miR-184的靶基因，研究表明ZNRF3在食管鳞癌细胞、胃癌中低表达，上调ZNRF3表达可促进癌细胞凋亡〔6〕。相关研究表明口腔鳞状细胞癌中ZNRF3低表达并可能起到抑癌作用〔7〕。然而miR-184是否可通过靶向调控ZNRF3表达进而影响OSCC细胞增殖、迁移及侵袭尚未有相关研究。本研究采用基因干扰技术沉默miR-184表达并分析miR-184表达变化对OSCC细胞增殖、迁移及侵袭的影响，验证其是否可通过调控靶基因ZNRF3而发挥作用并初步探究其可能作用机制，为OSCC治疗提供潜在靶标分子并可为基因治疗手段提供理论依据。

1 材料与方法

1.1材料与试剂 舌鳞癌细胞CAL27、SCC-15、SCC-9、UM1细胞均购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库；正常口腔黏膜细胞(Normol)购自美国Sciencell公司。杜氏改良培养基(DMEM)、胎牛血清(FBS)、LipofectamineTM2000转染试剂盒及Trizol试剂均购自美国Invitrogen公司；……