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蒙花苷对MDA-MB-231细胞雄激素受体的影响

2021-03-04左志琴沈志华深圳市中医院广东深圳58040江西中医药大学南昌330004

江西中医药 2021年12期
关键词:乳腺癌影响

★ 左志琴 沈志华,2(.深圳市中医院 广东 深圳 58040;2.江西中医药大学 南昌 330004)

乳腺癌是全球女性中最常见的癌症类型,每年影响数百万女性[1]。乳腺癌病例中有15 %~20 %被诊断为三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)[2]。临床上,TNBC被定义为雌激素受体(estrogen receptor,ER)和孕激素受体(progesterone receptor,PR)阴性且缺乏HER2的肿瘤。与激素受体和HER2阳性乳腺癌不同,TNBC 的治疗具有挑战性[3]。由于细胞分化差、分子异质性和快速转移,该病通常会产生化学耐药性[4]。快速复发、侵袭性强和预后较差是TNBC肿瘤的常见特征[5]。因此,迫切需要开发和优化TNBC的靶向治疗。最近,研究证实TNBC患者可表达雄激素受体(androgen receptor,AR),进行抗AR治疗可获益,且AR可以作为TNBC的治疗靶点[6-8]。密蒙花黄酮类化合物结构与雄激素类似,可以发挥拟雄激素效应。前期发现密蒙花主要成分蒙花苷对MCF-7细胞的AR具有调节作用[9]。在此基础上,研究蒙花苷对三阴性乳腺癌细胞株MAD-MB-231细胞AR的表达和细胞迁移的影响。

1 材料和方法

1.1 试剂和仪器 MDA-MB-231细胞株购买于中国科学院细胞库,目录号:TCHu227。蒙花苷(购自于上海源叶生物科技有限公司,批号:Z04A9L57508)。CCK-8试剂盒(日本同仁化学研究所,批号:TD826),反转录试剂盒(TAKARA,Cat# RR036A)。全自动酶标仪(RT-6000,Rayto);台式高速离心机(5417R,德国Eppendorf);Real-time PCR System(ABI 7500,美国ABI公司)。

1.2 实验方法

1.2.1 CCK-8检测蒙花苷对MDA-MB-231细胞活力的影响[9]细胞常规培养,干预组用蒙花苷(2.0,6.7,20.0,66.7,100.0 μg/mL)作用于细胞,对照组为正常条件培养的细胞,CCK-8法检测细胞活力,细胞增殖率(%)=(实验组-对照组)/对照组×100 %。

1.2.2 蒙花苷对MDA-MB-231细胞AR mRNA表达的影响[9]干预组用蒙花苷(2.0,6.7,20.0,66.7,100.0 μg/mL)作用于细胞,对照组为正常条件培养的细胞,Real-time PCR检测细胞AR mRNA表达。按RNA 抽提试剂盒步骤提取总RNA,紫外分光光度计测定总RNA浓度,取500 ng RNA 按反转录试剂盒步骤进行逆转录反应合成第一链cDNA(RT)。……

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