（青海省第四人民医院检验科，西宁 810000）

丙型肝炎病毒（hepatitisCvirus，HCV）为单股正链RNA病毒，是引起机体发生肝炎的主要病原体[1]。丙型肝炎的严重程度从持续几周以内的轻微病症到慢性严重疾病不等。载脂蛋白（apoprotein，Ape）L1是参与机体脂蛋白的代谢和胆固醇平衡的调节，影响机体血脂浓度[2]。本研究探讨慢性丙型肝炎患者ApeL1基因突变的检测，以明确两者的相关性。报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2017年8月－2019年5月在我院感染科门诊就诊的慢性丙型肝炎患者78例作为HCV组，同期选择健康人78例作为健康组。HCV组，男40例，女38例，年龄（45.20±4.20）岁，体质量指数（22.21±1.48）kg·m-2,白蛋白（88.29±2.19）g·L-1，血小板计数（178.20±23.09）×109·L-1；健康组，男39例，女39例，年龄（45.11±3.89）岁，体质量指数（21.18±2.19）kg·m-2，白蛋白（89.10±1.94）g·L-1，血小板计数（180.03±21.87）×109·L-1。2组入选者性别、年龄、体质量指数、白蛋白、血小板计数等比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 纳入与排除标准

HCV组，均为初治患者，慢性丙型肝炎诊断符合我国《丙型肝炎防治指南（2015年更新版）》；患者签署知情同意书。排除标准：自身免疫性疾病等患者；酒精性肝病患者；合并艾滋病患者；临床资料缺乏者。健康组，无肝炎病史；血生化结果检测正常。研究方案经医院伦理委员会审批。

1.3 基因突变检测

采集2组患者的静脉血采集静脉血5mL，抗后-70℃保存。提取全血组织的DNA，取稀释后2µL提取后的DNA，紫外分光光度计检测样品纯度的吸光度OD260/280nm需要在1.8～2.0，DNA浓度在100ng·pl-1以上。运用Bio-edit5.00软件对ApeL1基因序列进行引物设计（由上海生工公司合成），扩增ApeL1基因全序列（包含2个外显子和2个非编码区）。扩增片段：ApeL1-1-F：ACTCAGCTTTGTGGGAGCAT，ApeL1-1-R：AGGCTCCTTTTCACCCAGAT，ApeL1-2-F：TGCCCTTACCTCACAAAACC，ApeL1-2-R：AGGTTCTGCTGCCTCTTCAA，ApeL1-3-F：CAGCCTGTGTTTCATCTCCA，ApeL1-3-R：AATCACACACGTTGCAGGAA。PCR反 应 体 系：2×TaqPCRStarMix12.5μL，上下游引物各1μL，cDNA模板1μL，加ddH20至25μL，扩增循环数为40个循环，对扩增产物进行1.5%的琼脂糖凝胶电泳。……