李 艳，楚品品，雷 雯，勾红潮，蒋智勇，蔡汝健，宋 帅，卞志标，杨东霞，李春玲

（1.广东省农业科学院动物卫生研究所，广州510640；2.广东省畜禽疫病防治研究重点实验室，广州510640；3.农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站，广州510640；4.广东省妇幼保健院，广州510010）

猪伪狂犬病（pseudorabies，PR）是由疱疹病毒科α疱疹病毒亚科的伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的一种急性、高度接触性传染病，主要导致多种家畜及野生动物出现发热、奇痒、神经系统症状和脑脊髓炎等症状[1]。猪是其自然宿主和贮存宿主。2011年下半年以来，在中国多数地区猪场出现猪伪狂犬病病毒变异毒株，引起母猪的流产风暴及仔猪高死亡率，造成严重经济损失[2-3]。精准有效的病毒检测方法对于猪伪狂犬病的防控具有重要意义。gE基因是PRV的主要毒力基因之一，目前世界各国广泛使用的PRV基因缺失疫苗多为gE基因缺失苗，gE基因可用于区分PRV野毒和疫苗毒[4]。

LNA（locked nucleic acid）-TaqMan探针是一种应用于实时荧光PCR的新型探针，其在TaqMan探针的基础上选择性地将探针中的一些碱基修饰成LNA碱基，大大提高了探针与目标序列的亲和力，提高了探针的Tm值，同时探针信号增强，信噪比增大，极大缩短了探针长度，使检测灵敏度更高[5-6]。目前LNA-TaqMan探针已在病原[7-8]、基因突变[9-10]及鉴别诊断[11-12]检测等方面得到广泛应用。最新研究显示，该技术已成功应用于近期肆虐的非洲猪瘟病毒的检测[13]。目前尚未见有应用LNA-TaqMan探针检测PRV的荧光定量PCR方法的研究报道。

本研究根据gE基因保守区序列，设……