寨卡病毒SYBR Green I real-time PCR方法的建立及应用
2021-03-02刘宇梦李成辉李卓昕孙文超鲁会军金宁一
于 宁,刘宇梦,李成辉,李卓昕,汪 伟,孙文超,鲁会军,金宁一
(1.军事科学院军事兽医研究所,长春130122;2.延边大学农学院,延吉133000;3.广西大学动物科学技术学院,南宁5300001;4.温州大学病毒学研究所,温州325035)
寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)属于黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属(Flavivirus),基因组全长约为10.8 kb,为单股正链RNA病毒[1],仅含有一个开放阅读框,编码3个结构蛋白(C、E和prM)和7个非结构蛋白[2-3]。1947年,ZIKV在乌干达寨卡森林中的恒河猴体内被分离[4]。1952年,在乌干达及塔桑尼亚地区首次出现ZIKV感染病例,但并未造成大规模的暴发流行[5]。2016年2月,我国相继在广东、北京、山西及陕西等地发现输入性寨卡病毒感染病例[6-8]。该病毒主要由伊蚊传播,也可通过母婴、输血、性交和实验室暴露等方式传播[9]。有报道称,约有4/5的人在感染寨卡病毒后表现为隐性,1/5的人出现明显的临床症状,如发热、皮疹、结膜炎、肌肉和关节痛等[10],但通常会在维持2~7 d后自愈[11]。虽然多数情况下寨卡病毒感染具有温和的自限性,但也会引起严重的并发症,如婴儿小头畸形、格林-巴利综合征、男性睾丸损伤及眼病等[12]。该病毒给全球人类的健康带来了巨大的威胁。
目前国内外建立了诸多针对ZIKV的实验室诊断方法,例如,病毒分离培养、血清学及核酸检测等[13]。但病毒分离培养所需时间长,且黄病毒科成员间存在血清学交叉反应,对于已感染病毒1~2周的患者难以确诊,导致错过最佳救治时间,因此,这两种方法均不能满足临床检测对时效性及准确性的要求,亟需建立一种高效、精准的核酸检测方法。……
