陈 妍，丁云竹，杨永胜，徐欣欣，王 西，宫艳杉，杜晓莉，常维山，成大荣，徐建生，胡青海

（1.扬州大学兽医学院，扬州225009；2.中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241；3.山东农业大学动物科技学院，泰安271018）

鸭疫里默氏杆菌感染（Riemerella anatipesiferinfection）是鸭、鹅、火鸡等多种禽类的一种接触性传染病[1-2]，也是当前危害全世界养鸭业的一种主要疾病，造成了较大的经济损失。目前已经确认的鸭疫里默氏杆菌血清型至少有21个[3-4]，各血清型间的交叉保护性非常低，给使用疫苗防控疫病带来一定的难度。药物的使用是一些鸭场防治本病的重要手段，但是随着药物的广泛及长期使用，鸭疫里默氏杆菌耐药菌株也随之出现，导致一些鸭场在临床上采用药物治疗本病的效果显著降低。本实验室的前期研究表明，1997-2017年分离的所有鸭疫里默氏杆菌菌株都对卡那霉素耐受，但其耐受机制尚不清楚。构建细菌的转座子随机突变库是从基因组水平筛选毒力相关基因、生物被膜相关基因与特定表型相关基因等的一种重要手段[5-6]。本研究通过构建鸭疫里默氏杆菌Yb2株的转座子随机突变库，以期筛选和鉴定出鸭疫里默氏杆菌中与卡那霉素耐药相关的基因。

1 材料与方法

1.1 实验用菌株 鸭疫里默氏杆菌血清2型Yb2株由本实验室分离鉴定并保存；大肠杆菌BW19851（pEP4351）由美国University of Wisconsin-Milwaukee的Mark McBride教授惠赠，此大肠杆菌中携带的质粒pEP4351中含Tn4351转座子序列。

1.2 Yb2株Tn4351转座子随机突变库的构建和卡那霉素敏感性降低突变株的筛选 以大肠杆菌BW19851（pEP4351）为供……