张 婷，陆晨阳，任超超，包旦奇，陈鸿军，李雪松，杨健美，滕巧泱，李泽君，刘芹防

（中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241）

甲型流感病毒是能够引发动物和人呼吸道感染甚至死亡的具有传播性的病原，是一种负链RNA病毒，其基因组由8个RNA节段组成，目前共发现18种HA亚型和11种NA亚型。其中NS1蛋白是由甲型流感病毒第8个RNA片段编码的一种非结构蛋白，是病毒的毒力因子之一[1]，其通过抑制宿主蛋白表达，以及与宿主蛋白相互作用来发挥抗细胞凋亡的作用[1-2]，NS1蛋白还具有结合dsRNA功能从而抑制dsRNA活化的抗病毒信号通路，还可与RIG-Ⅰ、TRIM25、IKK、CPSF30、PABP Ⅱ、PKR结合，阻止干扰素的转录及合成，通过阻止NF-κ B的活化及抑制JNK（Jun N-terminal Kinase）、IRF-3和AP-1等多种信号因子的激活来抵抗宿主的抗病毒效应，增强病毒毒力[3]。

目前研究已证实，NS1抑制干扰素的功能具有宿主和毒株特异性，不同亚型流感病毒抑制IFN能力不同，例如H3N2、H2N2等毒株抑制干扰素能力弱于H1N1和H5N1亚型的毒株[4]，人源流感不同毒株的NS1蛋白功能存在明显差异，猪流感病毒NS1第42位氨基酸位点对拮抗干扰素具有重要作用[5]。本研究利用实验室分离得到的欧亚类禽H1N1猪流感和类鸭源H1N1猪流感这两株不同来源的甲型流感病毒，进行NS1蛋白抑制干扰素功能比较，为深入研究流感病毒NS1蛋白功能提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验材料 欧亚类禽H1N1猪流感病毒A/Swine/Shanghai/EA1/2016 (H1N1)、类鸭源H1N1猪流感病毒A/Swine/Shanghai/DL/2015 (H1N1)均为实验室从猪场采取的病料分离得到；293T细胞、flag真核表达载体、干扰素刺激物RIG-I/TBK-1/IRF-3真核表达质粒、IFN-luciferase干扰素启动子荧光素酶报告基因、Renila海肾荧光素酶报告基因质粒均由中国农业科学院上海兽医研究所动物流感病毒创新团队保存。……