周书亭，丁思嘉，凌 悦，廖卓韵，王子泓，邹霭萱，罗渝宵，黄梓鑫，陈宇翔，袁聪俐，朱建国，崔 立，杨志彪

（上海交通大学农业与生物学院 上海市兽医生物技术重点实验室，上海 200240）

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）引起的一种高度接触性肠道传染病，20世纪70年代首次被报道，并受到国内外学者的广泛关注。2010年PEDV变异毒株在中国出现并流行，传统毒株的疫苗保护效果并不理想[1]，因此对于PEDV致病机理的研究显得尤为重要。猪小肠绒毛上皮细胞是PEDV的易感细胞[2-4]，为了解析PEDV感染后其在细胞内复制的分子机制，有学者构建了猪小肠绒毛上皮细胞cDNA文库，通过靶细胞文库筛选与病毒复制相关的宿主细胞蛋白，研究其参与调控病毒复制的作用机理[5-6]。也有研究认为猪肠上皮细胞系IPEC-J2对PEDV感染效率并不高[7-8]。猪肾细胞（LLC-PK1细胞）是可传代的猪近端肾小管上皮细胞系，PEDV可以在LLC-PK1细胞系中进行体外增殖，其引起细胞融合的病变与Vero细胞相似，易于观察，且该细胞属于来源于PEDV感染的宿主动物，以宿主细胞LLC-PK1为PEDV体外感染模型研究病毒增殖特性的研究也越来越普遍[9-10]。

PEDV是一种有囊膜包裹的单股正链RNA病毒，属于冠状病毒科α冠状病毒属，其基因组全长约为28 kb，包括7个开放阅读框，编码S、M、E、N 4种结构蛋白和pp1a、pp1ab两个多聚蛋白，pp1a、pp1ab经过蛋白酶水解后进一步裂解为16种非结构蛋白（nonstructural proteins，Nsps），在PEDV病毒复制过程中发挥重要作用[11-12]。冠状病毒为了实现病毒基因组的完全转录和复制，需要将一些Nsps装成完整的酶复合体，其中Nsp12-Nsp7-Nsp8亚复合体被认为是介导冠状病毒RNA合成的最小核心组件[13-15]。……