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基于CRISPR/Cas9的拟南芥CKX3基因编辑载体构建及转化研究

2021-03-02王泽琛欧阳乐军李莉梅梁楚炎潘璟茵刘智超

植物研究 2021年6期
关键词:植物研究

王泽琛 肖 荣 欧阳乐军* 李莉梅 梁楚炎 潘璟茵 刘智超

(1. 喀什大学生命与地理科学学院,叶尔羌绿洲生态与生物资源研究高校重点实验室,喀什 844000;2. 广东石油化工学院生物与食品工程学院,茂名 525000)

植物生命活动的正常代谢由激素调控,其影响着植物的生命周期中的全过程。植物激素包括有生长素(auxin)、细胞分裂素(cytokinin,CK)、赤霉 素(gibberellin,GA)、脱 落 酸(abscisic acid,ABA)、油菜素甾醇类(brassinosteroids,BRs)、乙烯(ethylene,Eth)、茉莉酮酸酯类(jasmonates,JAs)、多胺(polyamines,PAs)以及水杨酸类(salicylic acid,SAs)等九大类[1],这些激素在植物体内构成一个复杂的调控网络,调控着植物生命周期中的各阶段。

细胞分裂素氧化酶(cytokinin oxidase,CKX)在20 世纪70 年代首次发现于烟草的髓组织培养物粗匀浆中,之后随着研究的深入在菜豆、蚕豆、小麦和玉米中相继被报道[2]。CKX 是一种黄素酶,对DNA 的次级代谢产物—细胞分裂素(CK)有着很强的专一性。CKX 是目前已知的专一降解天然异戊烯类CK 及其核苷的酶,该反应为不可逆降解,被认为是调节植物内源CK 含量的关键因素之一[3]。在CKX 发现之后的十多年中,绝大多数学者认为CKX 为含铜的胺氧化酶,在催化反应中其活性受到氨基乙腈和氰化物强烈抑制并且需要分子氧参与。研究表明CKX可以降解作为电子受体的2,6-二氯靛酚。随后,代谢产物H2O2在玉米重组CKX的研究中检测不到[4]。证明从大麦和小麦中纯化的CKX 的催化反应无需氧且不产生H2O2,因此建议将该酶更名为脱氢酶[5]。目前,在多种植物中CKX基因已经被克隆鉴定。经研究发现,在不同的物种中CKX基因均为多基因家族[6]。随着植物CKX基因的获取、转基因技术的发展以及模式植物的建立,极大加快研究CKX基因的功能的步伐。……

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