乔延召，刘 凯，李清华，黄建豪，卫恒习，张守全

(1 华南农业大学 动物科学学院/国家生猪种业工程技术研究中心，广东 广州 510642； 2 汕尾宝山猪场有限公司，广东 汕尾 516600)

精卵发生特异碱性螺旋环螺旋转录因子(Spermatogenesis and oogenesis specific basic helixloop-helix transcription factor,Sohlh1)是一种主要在睾丸和卵巢中表达的组织特异性基因，能够调控精子和卵子的发生[1]。公鼠睾丸中Sohlh1的mRNA最早可在胚胎发育12.5 d 时检测到，在胚胎发育15.5 d 时通过免疫组化检测到了SOHLH1 蛋白，免疫荧光试验进一步证实SOHLH1 蛋白在精原细胞中的特异性表达[1]。母鼠卵巢中Sohlh1的mRNA最早可在胚胎发育13.5 d 时卵细胞进入减数分裂Ⅰ期检测到，蛋白则在胚胎发育15.5 d 时检测到，在卵母细胞中SOHLH1 蛋白同时存在于细胞核和细胞质中[2]。研究表明，Sohlh1可能被视为原发性卵巢功能不全的调控基因[3]，非梗阻性无精子症也与Sohlh1基因的突变有关[4]。Sohlh1在生殖发育中更多的调控机制有待于进一步研究，以往的研究显示Sohoh1作为生殖细胞特异表达基因，其启动子被广泛应用于生殖细胞特异表达启动子，敲除此基因则被广泛应用到生殖发育障碍动物模型中。

作为一种理想的基因编辑技术，CRISPR/Cas9技术在模式动物制备[5-6]、遗传疾病治疗[7-9]、癌症研究[10-11]等多个领域得到了广泛的应用。但CRISPR/Cas9 系统存在脱靶问题[12]，效率受影响，Slaymaker等[13]把3 个带正电荷的氨基酸突变为非极性的氨基酸，大大降低了CRISPR/Cas9 系统的“脱靶”切割，使其效率显著提高。除基因编辑技术外，慢病毒转基因法以其稳定、高效整合的优势，也常常被应用在转基因细胞和动物生产中。……