王 荣，罗 倩，冯 怡

(西安医学院药学院，陕西 西安 710021)

山奈酚是一类从蔬菜水果及中药材中提取得到的黄酮醇类物质，其具有抗氧化、抗癌、防治糖尿病、保护损伤细胞等多种功能[1]。研究显示，山奈酚具有较强的抗氧化活性，可作为抗氧化剂添加在药物中。已有文献报道山奈酚能够通过清除活性氧、保护抗氧化酶的活性抑制活性氧诱发人红细胞的溶血[2]。但目前未有实验评估山奈酚对自由基的清除活性及其总抗氧化能力。

目前对抗氧化物质的体外活性评价方法主要有自由基(DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基等)清除实验，脂质过氧化抑制实验和总抗氧化能力的测定等评价方法。本实验基于酶标仪-微孔板，建立微量DPPH自由基清除、ABTS自由基清除和总抗氧化能力测定法，从以上三个方面验证山奈酚的体外抗氧化作用，为其作用抗氧化剂的应用提供科学依据。

1 材 料

1.1 药品与试剂

山奈酚标准品(含量95.5%，批号110861-201611)，中国食品药品检定研究院；抗坏血酸(Vc)(纯度99%)，北京索莱宝科技有限公司；DPPH(1,1-二苯基-2-苦肼基自由基)(纯度97%)，上海思域化工科技有限公司；ABTS([2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐])(纯度98%)，萨恩化学技术有限公司；总抗氧化能力(T-AOC)测试盒，南京建成生物工程研究所；无水乙醇，天津市河东区红岩试剂厂。

1.2 仪 器

全波长酶标仪，美国Thermo Fisher Scientific公司；分析天平，奥豪斯仪器有限公司。

2 方法与结果

2.1 DPPH·清除能力的测定

2.1.1 DPPH·标准曲线的绘制

避光称取DPPH粉末82 mg，无水乙醇定容于50 mL量瓶中，得1.64 mg/mL的DPPH母液。……