银耳多糖超声波提取工艺优化及抗BV2细胞炎症的作用研究
2021-02-23谢玲娜杜志云
谢玲娜,韩 萍,杜志云
(1. 广东工业大学 生物医药学院,广东 广州 510006;2. 佛山市康伲爱伦生物技术有限公司,广东 佛山 528225)
银耳(Tremella fuciformis)属于真菌门,担子菌纲,异隔担子菌亚纲。银耳目,银耳科,银耳属[1]。银耳有很多的别名,如雪耳、白木耳等。银耳是一种常见的食用菌,在福建、四川、贵州、浙江、湖北等地广泛种植。银耳多糖具有广泛的生物学活性和功能,包括抗衰老[2]、抗氧化[3-5]、抗肿瘤[6]、抗炎[7-8]和降低血糖[9]等。传统的银耳多糖提取工艺有酶提取法、酸提取法、碱提取法和热水浸提法等[10-15]。超声波辅助提取工艺是近年来较为常用的一种多糖提取方法,具有省时高效、节能环保的优点[16-17]。本文采用热水浸提法,辅以超声波提取工艺提取银耳多糖,通过对超声波功率、提取料液比、提取温度和提取时间进行单因素试验,并通过正交试验,确定最佳提取工艺。本研究还建立了脂多糖致小胶质细胞炎症模型,探讨银耳多糖的抗炎活性,为银耳多糖的进一步开发利用提供依据。
1 实验部分
1.1 主要试剂和仪器
1.1.1 主要试剂
银耳产自四川通江,购自佛山市爱伦生物技术有限公司。苯酚、浓硫酸、葡萄糖均为分析纯,购自阿拉丁化学试剂;无水乙醇、甲醇购自天津大茂化学试剂厂;脂多糖购自Sigma公司。DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)培养基、磷酸缓冲盐溶液(Phosphate buffer saline,PBS)、胎牛血清购自美国Gibco公司。BCA蛋白检测试剂盒(BCA Protein Assay Kit)购自碧云天生物技术有限公司;TRPV1Elisa试剂盒购自江苏酶标生物技术有限公司。
1.1.2 主要仪器
高速多功能粉碎机(武义海纳电器有限公司)、DK-S22电热……
